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分子医学技能实验:《蛋白质免疫印迹技术》
蔡卫斌博士主讲
本次实验目的:了解蛋白质免疫印迹技术的原理和基本过程,掌握蛋白质电泳及印迹技术的要点,学会用印迹技术检测样品中的微量靶蛋白。
本实验的特色之处是将分子生物学的蛋白质电泳技术和免疫学的抗体探针技术结合,体现了分子医学的学科交叉性。
实验课教学包括实验讲解、实验操作和课堂讨论三部分。
实验讲解部分由老师利用多媒体介绍实验原理和实验方法,并讲解详细的实验步骤,提醒操作注意要点。
实验操作由学生完成,老师从旁指导。实验首先通过SDS-PAGE电泳区分样品中不同的蛋白质组分,然后用湿式电转移法将电泳凝胶中的蛋白质组分转移到硝酸纤维素膜上。转移完成后,5%脱脂奶封闭硝酸纤维素膜,一抗、二抗抗体结合结合后DAB显色。学生通过这个实验,学会了蛋白质的垂直板电泳技术、电转移技术、免疫印迹检测技术,对分子医学实验技能的重要性有了更深的了解和认识。
实验完成后,老师对实验进行了总结,并提问了包括封闭液的作用、检测靶蛋白与一抗、二抗的关系等问题,与学生一起进行了探讨。




