一, 填空
1 细胞生物学研究中常用的光镜有( ) ( ) ( ) ( ) ( )
2 细胞培养一般分为( )和( )两种情况
3 感光片的种类很多,感色性是胶片的主要特性,根据这个特性一般黑白胶片分为( ) ( ) ( )
4 人口腔粘膜上皮细胞活体染色显示线粒体时用( )染成亮绿色
5 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察实验前两天给小鼠腹腔注射肉汤的目的( )
6 鉴别死活细胞用( )染色
7 过滤除菌常用的滤器( ) ( ) ( )
8 使用高压蒸汽锅灭菌时注意( )再升压,容器灭菌时不能使用( )以免炸裂
9 干热灭菌的缺点是( )
10 提取线粒体时匀浆机离心控制在( )进行
二 排序
1 青蛙血细胞中DNA和RNA的显示
A.固定 B.冲洗 C.分化 D.染色 E.取材和涂片 F.观察
2 动物细胞中糖元的显示
A.制作蜡块 B.染色 C.脱水.透明.封片 D.观察 E切片 F.取材
G.冲洗
3 小鼠精巣细胞减数分裂的观察实验中制备细胞悬液
A.软化 B.收获细胞 C.固定 D.低渗处理 E.再固定
4 在显影罐中进行黑白胶片的冲洗步骤
A.停显 B.水洗 C.晾干 D.装罐 E.定影 F.显影
5 单层细胞培养法(乳鼠肺组织细胞培养)
A.消化 B.计数 C.培养与观察 D.取材 E.离心 F.接种
三 简答
1 培养液中加入血清和谷氨酰胺的目的是什么
2 细胞传代培养的步骤
3 为什么在用胰酶消化细胞前需要用胰酶或PBS洗涤2次 用胰酶消化后立即加入新配好的培养液的目的
4 实验过程中无菌操作的要求
5 植物细胞骨架显示与观察的实验步骤
6 细胞生物学绘图的要求和方法
7 怎样将细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白显示出来
8 列举观察和研究细胞骨架的方法(至少4种)
9 检测糖元的一般方法及其化学基础
10 怎样使细胞中的酸性磷酸酶显示出来
11 有多种技术可显示中期染色体上的核仁形成区其中简单而又准确的方法是什么 该技术目前可应用于哪些方面
主要参考答案
一, 1 普通显微镜 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 倒置显微镜
2 原代培养 传代培养
3 色盲片 分色片 全色片
4 1/5000詹纳斯绿B染液
5 刺激小鼠腹腔产生较多巨噬细胞
6 0.4%台盼氏蓝染色液
7 玻璃滤器 微孔滤器 蔡氏滤器(赛氏滤器)
8 排放冷空气 橡皮塞
9 传导较慢
10 0——4℃
二,1 E A D B C F
2 F A E B G C D
3 D C A E B
4 D F A E B C
5 D A E B F C
三,1,血清作为生长因子,激素,贴壁因子的来源,有利于细胞贴壁生长,促进细胞分裂.
谷氨酰胺为细胞生长提供所需的氨基酸
2,①准备 ②消化 ③终止消化 ④计数 ⑤传代 ⑥观察
3,加PBS或胰酶的目的是消化原培养液中的小牛血清,以免影响消化效果.
立即加入新配的培养液是为了停止消化.因为培养液里有小牛血清,同时给细胞必要的营养物质防止细胞死亡.
4,①培养用品的清洗消毒 ②超净工作台的消毒 ③手的消毒 ④操作过程中的消毒
5,①取材 ②抽提 ③冲洗 ④固定 ⑤冲洗 ⑥染色 ⑦制片 ⑧观察
6,①绘图前应对标本进行仔细地观察并正确理解
②生物图中所有的部分都要以点或线来表示
③绘图的大小应适宜
④绘图时先把标本放在一个适当的位置
⑤绘图纸上所有的字都必须用硬铅笔以楷书写出,不得潦草
7.可用三氯醋酸处理标本抽提掉核酸,再用不同PH的固绿染液分别染色,便可将细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白显示出来.
8,观察和研究细胞骨架可用光镜,电镜,间接免疫荧光技术,细胞化学技术等方法.
9, 检测糖原一般采用过碘酸雪夫试剂反应,简称PAS反应.
PAS反应的化学基础是利用过碘酸将糖原氧化,把葡萄塘分子中2,3位碳原子之间的连接键打开,将其上的乙二醇基变为二醛基与雪夫试剂反应形成紫红色产物而显示肝糖原.
10,当酸性磷酸酶与作用底物甘油磷酸钠(含有磷酸脂)一起保温时,能使磷酸脂水解释放出磷酸铅沉淀物,沉淀物再与黄色的硫化铵作用时可形成黄棕色逐渐到棕黑色的硫化铅沉淀,使细胞中酸性磷酸酶显示出来.
11,银染法.
目前在临床细胞遗传学,肿瘤遗传学和化学致变剂遗传学效应等研究中已得到广泛应用.