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1988年生物化学
一， 选择题
1，用茚三酮试剂确定氨基酸是靠它与下面（ ）功能集团起作用。
2，影响酶催化效率的因素是（ ）。
3，在适当条件下，盐酸胍变性球蛋白的可逆性，可证明（ ）。
4，蛋白质中形成肽键平面的原因是（ ）。
5，三个氨基酸（Asp,Leu,Lys）的混合物，经过一个sulphonoted polysturene 阳离子交换
树脂粒，用PH5的缓冲液洗脱，洗脱液中氨基酸出现的顺序是（ ）。
6，溶液A的PH为7.0，溶液B的PH为6.0的两个溶液的体积相等，则其H+的含量关（ ）
。
7，0.01N醋酸的PH为3.4，0.01N HCl的PH是 2，用0.01N NaOH分别去中和15mL的以上醋酸和
盐酸，试问需用（ ）NaOH。
8,酶活性的国际单位（I.U.）定义为在30。C下，将底物转化为产物，在（ ）速度时
的酶量。
9，在PH5.0的经DEAE-纤维素柱纯化酶，此酶的比活从2.2U/mg提高到303U/mg，表明（
）
10，10-5毫克分子的乳酸脱氢酶，每秒催化10微克分子丙酮酸的生成，此酶的turnover num
ber 是（ ）。
11，胰凝乳蛋白酶中电荷延迟系统是指（ ）。
12，在整体代谢的调节环节调节中，别构效应可调节（ ）。
13，A因子存在时，一个酶的初速度对底物浓度曲线为S形，而当A因子浓度增高时，此线左移
，说明A因子是（ ）。
14，一个酶的Km为3X10
时，初速度是（ ）
15，在一个2底物-2产物酶反应系统中，对其中一个底物的Km值是（ ）。
16，一氧化碳有毒是因为（ ）。
17，胶原蛋白的特性是（ ）。
18，α螺旋与β折叠的区别（ ）。
19，促进酶分子催化反应的机制是（ ）。
20，酶可以改变（ ）。
21，转化丁二酸根为反丁二烯酸根所需要的酶是（ ）。
22，激素17β-雌二醇发挥效应的位置在（）。
23，3'-5'cAMP的性质是（ ）。
24，谷氨酸+丙酮酸=α酮戊二酸+丙氨酸，需要的辅酶为（ ）。
25，细胞液中脂肪酸的合成需要线粒体产生乙酸，乙酸是由（ ）带出线粒体膜。
26，氨对哺乳类细胞有害是因为（ ）。
27，U第一位上N原子来源是（）。
28，嘌呤生物合成关键步骤是（ ）。
29，当一个蛋白质样品不纯时，要测定它的性质，可用的方法有（ ）。
30，在同一细胞中，RNA和DNA杂交性质是（）。
31，DNA的Maxam-Gilbert化学法序列分析对底物的要求是（）。
32，单链DNA分子溶液形成双链的复性过程是（ ）级反应。
33，真核细胞中的RNA聚合酶III负责（）的合成。
34，DNA和RNA的差别在于（）。
35，一个操纵子的启动区产生一个降低的突变后会（ ）。
36，一个β珠蛋白mRNA的cDNA克隆可以在大肠杆菌中正确的进行肽的生物合成，而染色体基
因的克隆不能，这是因为（ ）。
37，分析了一个细胞中的蛋白质发现其Ile少于正常的情况，这是因为有好多Ile为Val所代替
，这可能发生了（ ）突变。
38，大肠杆菌核糖体的性质（ ）。
39，许多细胞含有一种酶，可以使DNA上少数C甲基化，产生5'-甲基-C，这种甲基化部位成
为CG转变成AG的突变热点，这是因为（ ）。
40，限制性内切酶的性质（ ）。
41，DNA生物合成的过程（ ）。
42，如由5'-脱氧尿嘧啶所引起的突变使一种嘧啶为另一种嘧啶所替换，这种转变叫做（
）。
43，假如一个mRNA样品，其G占29%，则C为（ ）。
44，在大肠杆菌中合成蛋白启始过程（ ）反应是必需的。
45，遗传密码的兼并性是指（ ）。
二，填空
1，蛋白质的最低自由能构型经常为--------残基之间的共价交连而加强。2，非极性环境中
，例如膜的内部，蛋白质可以折叠成--------侧链向外--------侧链彼此相互作用。
3，糖原异生受--------抑制，被--------激活。
4，由于--------调控--------酶而加速脂肪合成。
5，维生素B12是--------，它是--------酶的辅基，其作用是--------。
6，尿素循环中的调控酶是--------，存在于--------中，--------是此酶的正调节物。
7，由于--------酶的遗传缺陷使--------在尿中积累，加FeCl3使尿变成橄榄色。
8，由于--------酶的遗传缺陷使--------在尿中积累，见氧气变成黑色。9，膳食中------
--抑制--------酶从而影响胆固醇酯的合成。
三，问题
1，一个激素多肽链有29个氨基酸，顺序为Glu,Val,Lys,Asn,Cys,Phe,Arg,Trp,Asp,Leu,Gly
, Ser, Leu, Glu, Ala,Thr,Cys,Arg,His,Met,Asp,Gln,Cys,Tyr,Pro,Gly,Glu,Glu,Lys,
a,若没有二硫键存在，胰蛋白酶水解可有几个肽。
b,在PH7.5时激素净电荷是多少，若pKa值已知。
c,提出一个设计方案证明上述激素有二硫键。
2，为什么分子筛层析时小分子滞留时间长，而SDS电泳中小分子迁移得最快？
3，如何解释酶活性与PH的变化关系，假如其最大活性在PH=4或PH=11时，酶活性可能涉及那
些侧链？
4，写出下列生化反应式，并注明催化的酶及辅酶。
a, hydrolysis f, reduction of a double bond
b, Oxidative decarboxylation , g, isomerigation
c, phosphorolysis h, dehydration
d, non oxidative decarboxylation i, condensation
e, thiolysis j, phosphorylation
5,胃液大约PH2而分泌H+到胃中，分泌细胞内为PH7，假定H+梯度没有膜电势影响，计算形成
梯度的ΔG（RT=620卡/mol）。若ATP水解使H+分泌，计算每个ATP水解分泌的H+数目，若ATP水
解为-7.3千卡/克分子，细胞内ATP浓度为10
6,T1核糖核酸酶水解一个纯的Trna，得到一个寡聚核苷酸，再用蛇毒二脂酶水解此寡聚核苷
酸，产生pA,pC,pU和U，其比例是1：2：2：1，仅靠此以及tRNA分子3'端核苷酸序列的知识，
请写出此寡聚核苷酸序列。
7，在设计测定酶活性实验时，希望测得的最初速度对底物浓度的小量波动并不敏感，S/Km应
该大于多少才能使底物浓度有10%差别时，所测得的初速度的误差小于1%？（假定符合米氏公
式）
8，你克隆了一个有机体的cDNA基因，并标记此cDNA作为探针。此基因在基因组中只含有一个
，并且基因上无插入序列，也无EcoR I位点。如用此探针去与EcoR I切割的基因组DNA south
ern 转移膜杂交。那么你最可能找到几条放射性条带？如果你把此机体基因组DNA的一个BamH
I片段克隆，并能与你原有的cDNA探针杂交。现在你用这个标记的BamH I片段去与刚才的sou
thern转移膜杂交，你得到了几条放射性条带。请用图示说明EcoR I和BamH I位点与此基因末
端的可能相互关系。
1989年生物化学
一， 选择题
1，识别密码子GCU的反密码子为（ ）
2，拓扑异构酶I的功能为（ ）
3，真核生物RNA聚合酶I转录的RNA为（ ）
4，假如将15N标记的大肠杆菌在14N培养基种生长三代，提取其DNA 进行CsCl密度梯度离心，
其15N，14N杂和DNA分子与纯14N-DNA分子之比为（）
5，多数生物体内核糖核苷酸还原成脱氧核糖核苷酸发生在（ ）
6，氯霉素的抗菌作用是由于它（ ）
7，真核生物体内多肽链合成的第一个氨基酸为（ ）
8，用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时（PH3.0上柱）与树脂结合最牢的是（
）
9，竞争性抑制剂使 Vmax( ),Km（ ）
10，操纵子是（ ）
11，正协同效应的别构酶是Rs（ ）
12，用人工合成含有两种碱基的多核苷酸进行体外翻译，最可能形成的产物为（ ）
13，甲状腺素的作用是通过（ ）
14，有一大肠杆菌突变株，其DNA聚合酶III的3'-5'核酸外切酶活性缺陷，它将表现出（
）
15，糖异生的生理作用（ ）
16，从乳酸经糖异生形成葡萄糖共消耗（ ）ATP
17，用于多肽链专一性短裂方法中选择性最强的是（ ）
18，三羧酸循环中所有酶都位于线粒体的基质，除了（ ）
19，糖原是动物体内的多糖，它的结构特点是（ ）
20，三羧酸循环中异柠檬酸脱氢酶催化的反应，被（ ）影响
21，鱼藤酮阻断呼吸链是由于（ ）
22，厌氧条件下葡萄糖酵解产物是（ ）
23，油脂酰CoA通过β-氧化途径和TCA途径分解成CO2和H2O，共产生ATP数为（ ）
24．具有不同氧化水平的一碳单位载体是（ ）
25，糖原分解的调控（ ）
二，是非题
1，因为α螺旋是蛋白质构象稳定的重要因素，因此蛋白质活性部位通常在α螺旋区的表面（
）
2，糖皮质激素和肾上腺素都是提高血糖的激素（ ）
3，酶的Km值是酶的特征常数，它不随测定的PH和温度而改变（ ）
4，真核生物mRNA分子两端都有3'-OH（ ）
5，原核生物DNA为半不连续复制，真核生物DNA为全不连续复制（ ）
6，别构酶动力学曲线的特点都是呈S形曲线（ ）
7，多顺反子mRNA含有多个起始密码子和终止密码子（ ）
8，两条肽链反平行的β-折叠构象比平行的稳定（ ）
9，用SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量是根据蛋白质分子所带的电荷量而定（）
10，紫外线照射可引起DNA两条互补链上的T之间形成二聚体（ ）
三，写出下列缩写的生化名称
ACTH Cot1/2 RQ FADH2 LDL
四， 写出下列化合物的结构式
1，精氨酸
2，维生素C（还原型）
3，cAMP
4， 蔗糖（透视式）
5， ψ
6， 肌酸
7， 分枝酸
8， 卵磷脂
9， 11-顺视黄醛
10，甲状腺素
五，填空题
1，PH8.0时，ATP带--电荷。
2，tRNA的二级结构为--形，三级结构为--形。
3，NAD+和NADP+还原时，在--处有一个吸收峰。
4，当多肽键存在--残基时，α螺旋就被中断。
5，糖原合成酶D的别构调控物是--。
6，脂肪酸还原力的主要来源来是--途径。
7，丙酮酸脱氢酶复合物的调节控制的方式主要有--，--和--。
8，核酸复制时，DNA聚合酶沿模板链--方向移动；转录时，RNA聚合酶沿模板链--方向移
动；翻译时，核糖体沿模板链--方向移动。
9，预使酶反应速度达到Vmax的80%，此时底物浓度应是此酶Km值的--。
10，在厌氧酵解中每消耗
-。
11，从乙酰CoA合成胆固醇的限速步骤是从--形成--，由--酶催化。12，催化氨基酸联
合脱氢酶是--和--。
13，维生素D的活性形式是--。
14，细菌的DNA连接酶以--为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以--为能源。
15，在正常生理条件下，蛋白质分子中--和--侧链几乎完全带正电荷。
16，蛋白质生物合成时，生成肽键的能量来自--，核糖体在mRNA上移动的能量来源为--
。
17，胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂是--，它作用于该酶活性中心的--。
18，不能进行糖异生的氨基酸是--。
六，分析和计算题
1，有一氨基酸组成为Ala,Lys,Phe,的七肽，将它与FDNS反应，经酸水解后，生成游离的
DNP-Ala。将它用胰蛋白酶酶解，则得到一个三肽和一个四肽，它们的组成分别为：3Ala,Ph
e 和Lys,2Ala。将它用胰凝乳蛋白酶酶解，则生成一个六肽与一个游离的Ala。试写出其氨基
酸顺序。
2，今有以下4种蛋白质的混合物：（1）分子量12，000，pI=10；（2）分子量62，000，pI=
4；（3）分子量28，000，pI=7；（4）分子量9，000，pI=5；若不考虑其它因素，当它们（A
）流过DEAE-纤维素阴离子交换柱，用线性盐梯度洗脱时；（B）流经Sephadex G-50凝胶过
滤柱时，这些蛋白质的洗脱顺序如何？
3，若用
（1） H
|| ||
O O
4，假如突变导致脂肪细胞中过多产生依赖cAMP的蛋白激酶，试问影响脂肪酸代谢的突变效应
是什么？
5，已知cccDNA每结合一个嵌合染料菲啶溴红分子，双螺旋将解开26。左右，有一DNA制剂，
加入菲啶溴红使其沉降系数达到最低值，此时每个核苷酸平均结合菲啶溴红分子树为0.07，求
此DNA制剂的负超螺旋密度数值。
6， 叶绿体在充分光照，25。C，PH7.0的条件下，ATP，ADP，和Pi浓度分别为100，1和100u
M
（1）计算合成1克分子ATP需要多少自由能。
（2）为了合成ATP一对电子传递的最低电位是多少？
7， 某酶的Km为4.0X10
争性抑制剂浓度为6.0X10
1991年生物化学
一． 名词解释
拼接体 复制子 反馈调节 别构效应 抗体酶
二． 英译汉
THF ddTPP ACTH Hbs tRNAm micRNA ACP NADPH ΔGo' Co
t1/2
三． 填空
1.NAD+和NADP+还原时在--------增加一个吸收峰.
2.常用的DNA超螺旋结构的嵌合剂是--------
3.在癌变过程中同工酶谱发生--------
4.哺乳动物的必须脂肪酸为--------和--------
5.某些蛋白质前体都具有它的--------肽,它们大都相当于--------左右氨基酸的长度.残基
侧链一般是--------,位于肽链的--------末端.
6.糖蛋白中糖基与蛋白质肽链 之间可通过酰糖苷键相结合,即--------和--------
7.DNA序列的末端终止法所用的工具酶是--------
8.E.ColiRNA聚合酶的亚基组成为--------,没有--------亚基的酶称为核心酶,该亚基的功能
为--------
9,线粒体DNA的复制为--------方式,大肠杆菌染色体的复制为--------方式,ΦX174环状染色
体和噬菌体λDNA后期复制为--------方式,真核生物染色体DNA复制为--------方式
10,呼吸链电子传递速度受--------浓度控制的现象称为--------
11,胆固醇合成的限速酶是--------,--------浓度升高其活性下降
12,嘧啶环由--------和--------合成的
13,丙酮脱氢酶系统受--------和--------.--------三种调节控制
14,神经递质5-羟色胺是由--------衍生而成
15,乙酰辅酶A进入三羧酸循环,还是形成酮体,由细胞中--------浓度决定
16,生物固氮是微生物利用--------转变成氨的作用
四,是非题
1,编码区的翻译效率彼此不同( )
2,酶的Kcat型抑制剂比Ks型抑制剂专一性更强( )
3,紫外线照射可使DNA互补双链间形成T^T( )
4,一个氨基酸残基就是一个肽单元( )
5,DNA复制需要RNA引物,RNA复制则不需要引物( )
6,蛋白质进化过程中构象是易变的( )
7,由于遗传的密码兼并性,一个氨基酸可以有几种tRNA,但常只有一种氨酰-tRNA合成酶( )
8,蛋白质在热力学上最稳定的构象是自由能最低的结构( )
9,当一种大肠杆菌突变型为DNA聚合酶III的3'-5'外切酶缺陷时,该突变型表现的特征为对
紫外线敏感( )
10,在酸性条件下,DNA分子上的嘌呤不稳定,易被水解下来( )
11,严重糖尿病患者因其糖异生作用加强血酮症( )
12,杀鼠药氟乙酸的毒性是由于其抑制了顺乌头酸酶从而阻断了三羧酸循环( )
13,无糖膳食中用含有奇数碳脂肪酸比含有偶数脂肪酸作为食物更好( )
14,高胆固醇血患者因服用β-谷固醇而引起血浆胆固醇水平升高,增加动脉硬化危险( )
15,若amytal和抗霉素A阻断呼吸链的抑制百分数相同,amytal的毒性更大( )
五,分析与计算
1,当谷氨酸C3上标记C14,氨基标记15N,在肝脏中氧化降解,同位素将出现在下列代谢物的哪个
原子上, (1),琥珀酸,(2),天冬氨酸,(3),精氨酸,(4),尿素
2,今有以下四种蛋白质的混合物:(1)分子量为15,000,pI=10;(2),分子量为62,000,pI=4;(3)
,分子量为28,000,pI=8; (4),分子量为9,000,pI=6;若不考虑其它因素,当(A)用CM-纤维素层
析柱分离时,(B)用Sephadex G50凝胶层析柱分离时,试写出这些蛋白的洗脱顺序
3,在以下修饰碱基中,何者在形成双链时氢键结合的性质不同于和它相关的普通碱基
(1)2-甲基腺嘌呤(2)5-甲基胞嘧啶(3)5-羟甲基胞嘧啶(4)1-甲基鸟嘌呤