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36 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义第三节特异性免疫特异性免疫(specific immunity) 获得性免疫(acquired immunity) 适应性免疫(adaptive immunity):机体针对某一种或一类微生物或其产物所产生的特异性抵抗力,是后天获得的。免疫应答(immune response):发生在活生物体内的特异性免疫的系列反应过程。是抗原、抗体的特异性反应。抗原( antigen, Ag ); 免疫原(immunogen):能刺激诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T 淋巴细胞受体发生特异性免疫反应的大分子物质。免疫原性(immunogenicity); 抗原性(antigenicity)。免疫反应性(immunoreactivity); 反应原性(reactinogenicity)。半抗原(hapten);不完全抗原(incomplete antigen):只有反应原性,没有免疫性。完全抗原由两部分组成:载体(carrier):化学本质为蛋白质;半抗原。抗原的基本特性:具有一定化学组成和结构的大分子物质。异物性(foreignness):抗原的理化性质与其所刺激的机体的自身物质理化性质之间的差异程度特异性:由分子表面上特定化学基团所决定(抗原决定簇,antigenic determinant)。抗体(antibody):高等动物体在抗原物质的刺激下,由浆细胞产生的一类能与相应抗原在体内外发生特异性结合的免疫球蛋白。抗抗体(antiantibody):具有抗体功能的抗原刺激机体产生的相应的抗体。
37 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义抗体的结构五类抗体:IgG,IgA,IgM,IgD,IgE。
38 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义抗体形成的规律: 两次应答规律:初次免疫应答(primary immune response);再次免疫应答(secondary immune response)。回忆反应抗体出现的顺序:IgM 最早出现,IgA 最晚出现。影响抗体形成的因素: 抗原:是否按抗体形成的规律(亲缘关系,注射次数);机体:本身机体的差异。第四节免疫学方法及其应用抗原抗体反应的一般规律: 特异性:钥匙和锁;可逆性:Ag+Ab←→Ag·Ab; 定比性;阶段性:特异性结合阶段,可见反应阶段;条件依赖性影响抗原抗体间反应的因素: 电解质温度:温度上升,促进分子运动,增加抗原抗体的碰撞机会;但温度过高,抗原抗体解离、变性、破坏。一般最适温度为37 ℃ PH:蛋白质为两性电离性质,Ig 的等电点为PH=5~5.5。一般抗原抗体反应的PH 为6~8。抗原抗体间的主要反应: 凝集反应(agglutination) 直接凝集反应(direct agglutination):颗粒性抗原(完整细菌细胞或血细胞) 与相应的抗体在合适的条件下反应并出现肉眼可见的凝集团现象。凝集原(agglutinogen);凝集素(agglutinin);稀释抗体。
39 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义
定性:玻片法,已知抗体测未知抗原,如鉴定血型。
定量:试管法,已知抗原测未知抗体,诊断伤寒、肥达氏试验(Widal test)。间接凝集反应( indirect agglutination):需要载体,吸附可溶性抗原,成为人工的颗粒性抗原。测微量抗体,以增加测量的灵敏度。间接凝集抑制反应:将可溶性抗原与抗体混合,充分作用后再加入载体吸附相应的抗体。若此时抗体已被抗原中和,则不再发生凝集。用于检测抗原。如妊娠试验:孕妇尿中有绒毛膜促性腺激素HCG(抗原);尿+HCG 抗体; 再加入HCG 覆盖的红细胞。若尿中有HCG,HCG 与HCG 抗体接合,样品中无游离HCG 抗体。未出现沉淀,即发生凝集抑制,怀孕;出现沉淀,即未发生凝集抑制,未怀孕。
沉淀反应(precipitation):可溶性抗原与其相应的抗体在合适的条件下反应, 并出现肉眼可见的沉淀物。沉淀原(precipitonogen);沉淀素(precipitin);稀释抗原。环状沉淀反应(ring precipitation) 环状试验(ring test):用于抗原的定性;如鉴定血迹。絮状沉淀反应(flocculation precipitation):絮状反应,抗原与相应抗体在试管中或凹玻片上混匀,经过一段时间后,出现肉眼可见的絮状沉淀。如康氏试验(Kahn test)诊断梅毒。琼脂扩散法(agar diffusion) 免疫扩散法(immuno-diffusion)可溶性抗原与相应的抗体在半固体琼脂内扩散并进行沉淀反应。单向琼脂扩散( simple agar diffusion )定量测定抗原双相琼脂扩散( double agar diffusion )定性分析抗原或抗体对流免疫电泳(counter immuno-electrophoresis, CIE) 抗原和抗体分别置于凝胶板电场的正负极的小孔内,通电后抗原向正极移动而抗体向负极移动,在两孔间合适的抗原抗体浓度处会形成一条沉淀线。双相琼脂扩散与电泳技术的结合。 40 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义火箭电泳法(rocket electrophoresis) 在已混有抗体的凝胶板上的小孔内加入抗原并进行电泳,在沿着电泳方向会形成火箭型沉淀线。已知标准抗原量可方便地测定未知标本中的抗原量。单相琼脂扩散与电泳技术的结合。双向免疫电泳(two dimentional immuno-electrophoresis) 免疫电泳与火箭点泳的结合。补体结合反应(complement fixation test) 有补体参与,并以绵羊红细胞和溶血素(红细胞的特异性抗体)是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原抗体的结合反应。2 个系统,5 种成分免疫荧光技术(immunofluorescens technique) 荧光抗体法(fluorescent antibody technique):抗体与荧光素结合形成荧光抗体。免疫酶技术( immunoenzymatic technique) 酶免疫测定法(enzyme immunoassay): 用酶作标记的抗体或抗抗体,进行抗原抗体反应的高灵敏度的免疫标记技术。
41 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义 放射免疫测定法(radioimmuno-assay):利用放射性同位素标记抗原或抗体。免疫反应的应用: 预防接种自动免疫和被动免疫的区别(见下表) 自动免疫被动免疫免疫产生较慢立即获得免疫体内可持续产生抗体抗体量不超过注射量再接受抗原增加反应无增加反应维持时间较长维持时间较短用于预防用于应急用于治疗:疫苗:类毒素(白喉类毒素、破伤风类毒素);免疫血清(抗毒素、丙种球蛋白);活疫苗:卡介苗,甲肝疫苗,脊髓灰质疫苗;死疫苗:百日咳,伤寒, 霍乱,乙脑,乙肝; 用于诊断;用于微生物分类。变态反应(allergy) 超敏反应(hypersensitivity):机体受同一抗原物质再次刺激后产生的一种异常的或病理性的,以组织损伤或生理功能紊乱为表现的免疫反应。变应原(allergen):完全抗原、半抗原完全抗原:异种血清蛋白,微生物,寄生虫,花粉,鱼,虾。半抗原:青霉素半抗原进入机体与组织结合成为完全抗原。变态反应的发生:变应原的剂量;进入体内的途径;机体免疫机能的状态。过敏反应:变应原与固定在细胞(肥大细胞)上的特异性抗体结合,使细胞释放过敏介质,从而引起效应器官生理功能紊乱。个体差异明显;反应快,消失也快;反应发生重;抗体为IgE。
42 华东理工大学《微生物学教程》上课讲义 青霉素过敏反应: 青霉素分子(β-内酰胺环中的羧基)直接与人体内蛋白中的氨基结合,形成青霉噻唑蛋白。青霉素降解产物(青霉烯酸)与人体蛋白质结合。防治变态反应: 检出过敏原并避免接触; 脱敏治疗:小量多次注射某过敏原进行脱敏。例如:破伤风抗过敏药物;抗组胺药物:扑尔敏,息斯敏。




