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石正国的上海生科院分子遗传考研笔记、基础知识、资料、试题及答案分析
作者:石正国 来源:本站社区 点击: 时间:2004-9-2

    答    案:  真核生物的基因较大,在制作基因组文库(一个克隆内的每个细胞内的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,这样的一套克隆叫基因组克隆,其中克隆的一套基因组片段即为基因组文库。)时也常被打断,使之分散在两个或两个以上的克隆中。除了可以不同的探针寻找外,也可以通过已经找到的克隆,取其外源DNA的末端片段进行亚克隆,然后分离这段DNA,经放射性标记,作为探针再与基因组文库中其他克隆进行杂交,以寻找与原来克隆中外缘DNA片段有重叠的基因组克隆。利用这种方法不但可以重建一个大的基因,而且可以鉴定染色体上很大的区域。即可以从染色体上某一已知的起始点,可以“步行”到染色体上另一个区域并考察所经过的路程,如限制酶图谱甚至序列分析,因而这种方法称染色体步行法。
    题    目:5、简述E.ColiDNA复制起始的主要步骤。
    考查点 :  复制的起始。
    答    案:  大肠杆菌DNA复制起始的步骤如下:
        ⑴转录激活        由RNA聚合酶发动的转录作用主要从16Kda基因的启动子(Pz)以及asnC的启动子(P1)开始,由右至左进入oriC。这些转录物在oriC内大约有20个终止点簇。其中大部分位于oriC的左半边。
    ⑵起始复合物的形成    需要负超螺旋的oriC、ATP、DnaA、HU蛋白、TopI。DnaA结合于R1—R4位点;HU蛋白识别并刺激oriC复制而抑制其它潜在的复制原点上的复制;TopI也是oriC特异性复制所必需。ATP是必需的但不被水解。
    ⑶预引发体的形成     其前提条件是DnaA已经结合于R1—R4位点。DnaB-DnaC六聚体与oriC结合预引发体。
    ⑷RFI*的形成     在DnaB的螺旋酶活性和DNA旋转酶的拓扑异构酶活性作用下,以水解ATP为能源,促进大范围的解链(SSB与单链DNA结合),在oriC区域负超螺旋提高10-15倍,形成一个具有很高迁移率的复制形式,称RFI*。
    ⑸引发体的形成     高度解链的模板与蛋白质的复合体促进DNA引发酶加入进来形成引发体,然后合成引物RNA。
    ⑹DNA的合成      由DNA聚合酶Ⅲ全酶担任,其中α-亚基为聚合酶,ε-亚基为3’→5’外切核酸酶,β-亚基保证全酶作用的进行性,τ-亚基和γ-亚基复合体则保证了β-亚基作用的发挥。
    试   题  篇  

                         分 子 遗 传 学

                             二、考研试题

           中国科学院1994年硕士生入学考试分子遗传学试题
    一、 名词解释。每题2分,共10分。
    1、引物和引发酶    2、诱导物(inducer)     3、组成型突变(Constitutive  mutation)
    4、RNA拼接(RNA  splicing)              5、原病毒(Provirus)
    二、是非题。每题1分,共20分,答是写“+”,答非写“—”。
    1、以繁殖DNA片段为目的的载体通常称为穿梭载体。                     (    )
    2、哺乳动物各类不同的细胞中均有相同的一组基因在表达,由于他们的功能为每个细胞所必需,这些基因有时被称作奢侈基因。                              (    )
    3、真核生物启动子不一定都位于转录起始点上游。                       (    )
    4、反式作用因子SP1是SV40转录所必需的,它所识别的DNA序列是CCAAT。 (    )
    5、在个体发育过程中,表达基因的数目逐渐增多。                       (    )、6、环形双链DNA一般没有固定的复制终点。                             (    )
    7、真核生物只有很少的复制起点,但它的DNA聚合酶活性很高,故在一定时间内也能完成复制。                                                            (    )
    8、大肠杆菌有三中DNA聚合酶,其中DNA聚合酶Ⅰ是复制过程中的主要聚合酶。(    )
    9、在DNA的五种主要修复系统内,SOS修复是唯一导致突变的修复。         (    )
    10、端粒DNA是高度民主重复序列,其通用形式为Cn(A/T)m:Gn(T/A)m。其中一条为富A链,另一条为富T链。                                             (    )
    11、随着生物的进化,生物体的结构与功能愈复杂,并愈倾高等,其C值愈大,在此规律中无一例外。                                                       (    )
    12、编码丝氨酸有6种密码子,因此要有6种丝氨酰tRNA来识别它们。      (    )
    13、具有相同反密码子(携带相同的氨基酸)的tRNA的结构都是相同的。    (    )
    14、真核生物有三种RNA聚合酶,每一种都有自己的启动子模型。             (    )
    15、逆转录酶拷贝出的DNA保真度很低,错配碱基的出现机率要比真核生物或E。Coli高1——3个数量级。                                                  (    )
    16、酵母Ty成分的转座机制与细菌转座元的转座机制一致。                (    )
    17、点突变是指引起产物氨基酸序列改变的DNA碱基的突变。               (    )
    18、在还原病毒基因组的5’末端有帽子结构,3’末端有poly尾巴。       (    )
    19、在E.Coli突变体的DNA中,普遍存在着chi结构。                    (    )
    20、真核生物的同源重组发生在减数分裂的极早期。                       (    )
    三、选择题。每题1分,共15分。
    1、在真核基因表达调控中,      调控元件能促进转录的速率。
       A、衰减子   B、增强子   C、repressor    D、TATA  box
    2、在真核基因与原核基因表达中,RNA   polymerase嫩识别      。
       A、基因上游的promoter区              B、enhancer  
       C、Dnase Ⅰ超敏感位点                   D、poly A  sequence
    3、哪一种限制性内切酶既能识别又可以切割所有的(包括甲基化的和未甲基化的)CCGG序列?……
         A、EcoRⅠ     B、MobⅠ     C、MSPⅠ     D、HPaⅡ
    4、环性双链DNA在复制将近结束时,由哪一个酶进行解环链?……
         A、拓扑异构酶Ⅰ    B、拓扑异构酶Ⅱ   C、解旋酶
    5、哪一种DNA聚合酶存在于线粒体和核内?……
    A、DNA聚合酶α   B 、DNA聚合酶β  C 、DNA聚合酶γ  D 、DNA聚合酶δ
    6、在几种DNA复制修复系统中,唯一不利用ATP为能源的是……
          A、切除修复   B、光复活   C、二聚体糖基修饰   D、SOS修复  E、重组修复
    7、从以下三种基因中,选择一种最新的分子生物学定位方法。……
          A、遗传交换法    B、接合法   C、染色体步行和染色体跳跃法
    8、人类线粒体基因的终止密码子有      个。
          A、1      B、2    C、3      D、4
    9、核基因mRNA的内元的拼接点按照所谓的Breathnach-Chambpon规则,其序列为   。
           A、↓AU……AC↓     B、↓GU……AG ↓  
           C、↓UG……AC↓       D、↓GA……AU↓
    10、sextamo  框,又称RNA聚合酶识别位点,RNA聚合酶的哪个亚基识别该位点?……
             A、α    B、δ    C、β           D、β’
    11、无义突变是指某个碱基的突变造成         的突变。
             A、不改变产物氨基酸的序列。     B、改变产物氨基酸的序列,但对最终蛋白活性影响不大。   C、改变产物氨基酸的序列,并使最终蛋白失活。   D、改变产物氨基酸的序列,使成终止密码子。  
    12、碱基类似物在DNA复制的渗入而造成的突变,经过     ,可以造成稳定的可遗传的突变。
          A、一轮复制     B、二轮复制     C、三轮复制     D、四轮复制    
    13、RecA蛋白除具有在DNA损伤或复制受阻时,促进特异蛋白的分解外,另有     活性。
          A、单链和双链DNA结合  B、NTP酶    C、促进互补单链复性   D、A+B+C
    14、具有两种不同颜色孢子的杂合体子囊团,在细胞的减数分裂和有丝分裂之间,如有一个异源双敛被修复,则8个子囊孢子将按      的比例发生分裂。
          A、4:4    B、5:3    C、6:2     D、7:1
    15、原核生物和真核生物的释放因子都是作用于核糖体的      。
          A、A位点    B、P位点  C、5srRNA位点  D、EF-Tu位点  
    四、填空题。每题2分,共30分。
    1、穿梭载体通常是指那些能在中       繁殖,又能在中       繁殖的载体。
    2、调控蛋白的结构花式有       、       和       。
    3、Ribozyme(核糖核酸质酶),表示这类酶的化学本质是          ,是RNA所具有的性质           。
    4、人体β类珠蛋白基因族是由       、       、       、       和       五个基因组成。
    5、根据DNA合成的起始方式,DNA的复制分两       类:第一类为       ,主要指           。第二类为       ,主要指                 。
    6、超螺旋DNA对于变性剂有较高的        ,并具有较高的           和           。
    7、主要的串联重复基因有       、       和       等。
    8、根据对DNA序列和蛋白质因子的要求,可以把重组分为       、       、       和
             四类。
    9、能远距离调节启动子以降低转录速率的DNA序列称       ,其降低作用与       无关,与它在基因的       无关。
    10、Tn10两端的末端倒转重复有       bp长,但只有最靠外侧的      bp为转座作用所必需。
    11、λDNA的整合是一种      重复过程,此过程为λ噬菌体      酶催化。
    12、真核生物的      、      、      三种rRNA组成一个转录元,转录元产生      的前体RNA分子。
    13、Jacob 和Monod根据对      的研究,于1961年提出了操纵元模型,其要点是      。
    14、在原核生物基因表达调控过程中,因为没有核膜,      和      是偶联的,这是原核生物中      的基础。
    15、逆转录酶是一种非常复杂的酶,在其简单的一条肽链上有多种酶活性,起主要没活性有          、           、          、         、          和          。
    四、 问答题。2——4题3题,每题6分; 1题必做,7分。共25分。
    1、 简述遗传物质在原核生物和真核生物的细胞内的分布和结构的异同。
    2、 细胞内翻译后的蛋白质的共价修饰主要包括哪些方面?
    3、 简述非病毒返座元的最大特点。
    4、 简述DNA的滚环复制并作出一般性模式图。

      中国科学院2002年硕士生入学考试分子遗传学试题(选)
    一、 名词解释。(每题3分,共18分。)
    1、分子伴侣         2、核糖核酸质酶(Ribozyme)      3、光复活
    4、基因组(geneome)     5、异染色质化              6、诱导物(inducer)
    四、问答题。(每题8分,共48分。)
             1、简述真核生物基因的组织结构。
             2、试设计一个实验来证明DNA的半保留复制。
             3、试说明真核生物的核小体及核小体的结构特点。
             4、试述酵母GCN1调控因子对DNA表达调节的分子机制。
             5、简述Ty1成分的特点和转座机理。
             6、同远重组的分子机理。




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