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题 目：5．基因剔除（knock out）的方法主要是用来阐明（）
（1）基因的结构 （2）基因的调控 （3）基因的表达 （4）基因的功能
考查点 ： 基因剔除的概念。
答 案： （4）基因的功能
题 目：6．羧肽酶含有的金属离子是（）
（1）镁 （2）锌 （3）铜 （4）铁
考查点 ： 羧肽酶的组成。
课本内容： 羧肽酶A（carboxypeptidase A）是一个具有307氨基酸的单链蛋白质，其中紧密地结合着一个锌离子，它对酶活性很重要。
答 案： （2）锌
题 目：7．反转录酶除了有以RNA为模板生成RNA－DNA杂交分子的功能外，还有下列活性 （ ）
（1）DNA聚合酶和 RNase A （2）DNA聚合酶和S1核酸酶
（3）DNA聚合酶和 RNase H （4）S1核酸酶和 RNase H
考查点 ： 反转录酶的功能
课本内容： 反转录酶兼有三种酶的活力：1、利用RNA模板合成cDNA，形成RNA-DNA分子（RNA指导的DNA聚合酶活力）。2、可在cDNA链上形成另一条互补DNA，形成双链DNA分子（DNA指导的DNA聚合酶活力）。3、还有Rnase H活力，专一水解RNA-DNA分子中的RNA，可沿着3’→5’、 5’ →3’起外切酶的作用。
答 案： （3）DNA聚合酶和 RNase H
相关内容： 反转录的过程。
题 目：8．判断一个纯化酶的工作的重要指标是（ ）
（1）酶的纯度 （2）活性回收率 （3）重复性 （4）综合以上三点
考查点 ： 酶的提取
课本内容： 比活力是酶学研究及生产过程中经常使用的数据，可用来表示每单位重量酶蛋白的催化能力。对于同一种酶来讲，比活力越高，表明酶越纯。
答 案： （4）综合以上三点
题 目：9．对于一个遵守米氏方程的酶，当活性达到最大反应速度的 99％时，底物浓度是其Km值的倍数为（）
（1）10 （2）100 （3）90 （4）99
答 案： （4）99
题 目：10．一个酶有多种底物，判断其底物专一性强弱应依据参数（）
（1）Kcat （2）Km （3）Kcat/Km
答 案： （2）Km
题 目：11．线粒体内膜 ATP合成酶合成 ATP的过程中，有一步是需要能量的，它是（）
（1）酶与Pi结合 （2）酶与ADP结合 （3）Pi与ADP在酶上生成ATP
（4）生成的ATP从酶上释放
考查点 ： 氧化磷酸化
答 案： （4）生成的ATP从酶上释放
题 目：12．抗霉素A对呼吸链（电子传递链）抑制的作用点在（）
（1）NADH脱氢酶附近 （2）琥珀酸脱氢酶 （3）细胞色素b附近
（4）细胞色素氧化酶
考查点 ： 呼吸链
课本内容： 抗霉素A有抑制电子从细胞色素b到细胞色素c1的传递作用。
答 案： （3）细胞色素b附近
相关内容： 电子传递抑制剂、抗霉素A的结构。
题 目：13．甲状腺素是一种含碘的（）
（1）氨基酸 （2）多肽 （3）蛋白质 （4）寡糖
考查点 ： 甲状腺素的结构
课本内容： 甲状腺素是在甲状腺内由2分子二碘酪氨酸（DIT）作用而形成的，同时还生成1分子丙氨酸。
答 案： （1）氨基酸
题 目：14．生物膜在一般条件下都是呈现脂双层结构，但在某些生理条件下可能出现非脂双层结构，目前检测非脂双层结构的方法主要是（）
（1）荧光分析 （2）分光光度 （3）顺磁共振 （4）核磁共振
考查点 ： 生物膜的结构及其研究方法。
答 案： （4）核磁共振
题 目：15．生物膜的厚度在（）
（1）600nm左右 （2）60nm左右 （3）6nm左右 （4）0.6nm左右
答 案： （3）6nm左右
题 目：16．胸腺嘧啶除了是DNA的主要组份外，它经常出现在有的RNA分子中，它是（）
（1）rnRNA （2）tRNA （3）tRNA （4）5S rRNA
考查点 ： RNA的组成特点。
课本内容： （tRNA）的假尿苷嘧啶核苷-胸腺嘧啶核糖核苷环（TΨC）由7个核苷酸组成，通过5对碱基组成的双螺旋区（TΨC臂）与tRNA其余部分相连。
答 案： （2）tRNA
题 目：17．嘌吟霉素的作用是（）
（1）抑制DNA合成 （2）抑制RNA合成
（3）抑制蛋白质合成的延伸 （4）抑制蛋白质合成的终止
考查点 ： 抗生素的作用机制。
课本内容： 嘌呤霉素（puromycin）对蛋白质生物合成有独特的作用，它与50S亚基A部位结合，抑制氨酰-tRNA的进入，从而引起肽链合成的过早终止。
答 案： （4）抑制蛋白质合成的终止
题 目：17、催化核糖-5-磷酸与ATP生成5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）的酶是（）
（1）磷酸核糖激酶 （2）磷酸核糖焦磷酸激酶 （3）磷酸核糖酶（ 4）ATP激酶
考查点 ： PRPP的生成。
课本内容： 在体内，5-磷酸核糖焦磷酸可由5-磷酸核糖与ATP作用产生。催化这一反应的酶称为磷酸核糖焦磷酸激酶。
答 案： （2）磷酸核糖焦磷酸激酶
题 目：19．DNA分子上被依赖于DNA的RNA聚合酶特异识别的顺式元件是（）
（1）弱化子 （2）操纵子 （3）启动子 （4）终止子
考查点 ： 基因的表达调控
课本内容： 启动子是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的DNA序列。
答 案： （3）启动子
题 目：20．核内DNA生物合成（复制）主要是在细胞周期的（）
（1）G1期 （2）G2期 （3）S期 （4）M期
考查点 ： 细胞周期时相
答 案： （3）S期
题 目：21．甾体激素对基因表达的调节是通过（）
（1）甾体自身直接作用在基因调控序列上 （2）激活膜上酪氨酸蛋白激酶
（3）与受体结合进人细胞核作用在调节元件上
考查点 ： 甾体激素的作用机制。
答 案： （3）与受体结合进人细胞核作用在调节元件上
题 目：22．真核生物RNA聚合酶的抑制剂是（）
（1）利福霉素 （2）放线菌素 （3）利链霉素 （4）α鹅膏蕈碱
考查点 ： 真核RNA聚合酶的性质。
课本内容： 利福霉素，特别是利福平，是细菌的依赖DNA的RNA聚合酶的特效抑制剂。
真核生物RNA聚合酶是按对α鹅膏蕈碱的敏感性来分类的。
放线菌素D通过与模板DNA的结合的方式妨碍转录反应而抑制细菌生长。在低浓度时，它抑制转录，但不能影响DNA复制，也不直接影响蛋白质的合成。
答 案： （4）α鹅膏蕈碱
题 目：23、组蛋白的修饰可引起核小体的解离，这种修饰是……（）
（1）甲基化 （2）腺苷化 （3）磷酸化 （4）糖基化
考查点 ： 组蛋白的修饰
课本内容： ADP核糖基转移酶（ADPRT）在DNA断裂作用的刺激下迅速从NAD+上将核糖基转移到许多核蛋白上，包括组蛋白，松解了染色质。经核糖基化的蛋白促进DNA的修复。
答 案： （4）糖基化
题 目：24、氨基酸掺入肽链前必须活化，氨基酸的活化部位是……（ ）
（1）内质网的核糖体 （2）线粒体 （3） 高尔基体 （4）可溶的细胞质
考查点 ： 氨基酸活化
课本内容： 氨基酸在掺入肽链之前必须活化以获得额外的能量，在氨酰-tRNA合酶的催化下进行。活化了的氨基酸与tRNA形成氨酰-tRNA。这一反应是在可溶性的细胞质内完成的。
答 案： （4）可溶的细胞质
题 目： 25、 T4 DNA连接酶催化的连接反应需要能量，其能量来源是 …… （ ）
（1）NAD （2）ATP （3）GTP （4）乙酰CoA
考查点 ： T4 DNA连接酶的功能。
课本内容： 由于连接反应是在3’-OH和5’-P间进行的。因此须由ATP或NAD的水解来提供能量。在真核生物中使用ATP、原核生物如大肠杆菌中使用NAD。
答 案： （1）NAD
三、填空题。每空1分，共25分。
题 目： 1、组成蛋白质的氨基酸，在远紫外区均有吸收，但在近紫外区只有 、 和 有吸收光的能力。
答 案： 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸
题 目：2、免疫球蛋白G在用 处理时，产生Fab片段；而用 处理时，产生Fab’2片段。
答 案： 木瓜蛋白酶、胃木瓜蛋白酶
题 目： 3、细胞色素氧化酶除含 辅基外，还含 ，它也参与氧化还原。
答 案： 血红素、2个铜原子
题 目： 4、一个酶的分类编号为EC3.4.2.1，它属于 类。
答 案： 水解酶类
相关内容： 酶的国际分类方法：1、氧化还原酶类；2、移换酶类；3、水解酶类；4、裂合酶类；5、异构酶类；6、合成酶类。
题 目： 5、糖酵解中最关键的调节酶是 。
答 案： 磷酸果糖激酶
相关内容： EMP途径的调控位点有：己糖激酶、二磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶。
题 目： 6、磷酸化酶激酶是一种依赖 的蛋白激酶。
答 案： 钙离子
题 目： 7、带Ⅲ蛋白是一种 。
答 案： 阴离子（Cl-/HCO3-）载体
题 目： 8、低密度脂蛋白（LDL）受体的作用是 。
答 案： 转运内源胆固醇。
题 目： 9、线粒体内膜胞浆侧的膜电位比基质侧为 。
答 案： 高
题 目： 10、异戊烯醇焦磷酸酯是合成一些重要生物活性化合物如 等的活泼前体。
答 案： 它们可以相互缩合延长碳链成胆固醇、胆酸、固醇类激素、维生素D、维生素E、维生素K、类胡箩卜素、麝香。植物体内的橡胶、植醇、松节油、桉树油、柠檬油、质体醌、昆虫保幼激素、蜕皮素等。
题 目： 11、当DNA复制时，一条链是连续的，另一条链是不连续的，称为 复制；复制得到的子代分子，一条连来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种方式叫 复制。
答 案： 半不连续复制、半保留复制
题 目： 12、双链DNA分子中，一条链组成为：A-23%、C-18%、G-35%、T-24%，按Chargaff规则，另一条链组成为：A- %、C- %、G- %、T- % 。
答 案： A-24%、C-13%、G-18%、T-23% 。
题 目： 13、大肠杆菌有三种DNA聚合酶，DNA聚合酶Ⅰ主要参与 和 。DNA聚合酶Ⅱ仅参与 。DNA聚合酶Ⅲ主要参与者 。
答 案： 校对、修复、复制。
四、问答题。每题6分，共30分。
题 目： 1、简述蛋白质在翻译后，多肽链形成具有生物活性的构象所需的几种加工过程。
考查点 ： 新生肽链的修饰。
参考答案： 按照蛋白合成后修饰的过程，可以分为信号肽及其切除、内质网修饰、高尔基体修饰等几个阶段。
信号肽及其切除 信号肽长为13-26氨基酸，N-末至少有一个带正电荷的氨基酸残基，中部一段有10-15残基由高度疏水性的氨基酸组成，如丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸、异两氨酸和苯丙氨酸。不一定都位于新生肽的N-末。
新生肽合成不久，有信号肽的蛋白的核糖体，受N-端信号肽所控制，进入内质网进一步合成蛋白质，使得原来表面光滑的内质网（ER）变成有局部突起的粗糙内质网。与内质网相结合的核糖体可合成三类蛋白质：溶酶体蛋白、分泌到胞外的蛋白、构成膜骨架的蛋白。
内质网修饰 多肽移位后，在内质网的小腔中被修饰，它包括N-端信号肽的切除、二硫键的形成使多肽呈现一定的空间结构、糖基化作用。
糖基化作用使许多肽键变成糖蛋白（膜本体蛋白、抗原蛋白）。糖苷键有：与Asn侧链氨基相连的N-糖苷键，与Ser、Thr侧链-OH相连的O-糖苷键。通常是五聚糖（3甘露糖、2N-乙酰氨基葡萄糖）。
高尔基体修饰及多肽分选 高尔基体对糖蛋白上的寡聚糖核作进一步的修饰调整，也借助于M6P等信息将多肽链分类，送往溶酶体、分泌粒及质膜等进行归位。
通过上述三个阶段的修饰，既形成了有生物活性的构象，分别参与相应的过程中去。
题 目： 2、说明双倒数作图的原理和可能反映的信息。
考查点 ： 双倒数作图法（Lineweaver-Burk法）
参考答案： 双倒数作图法是常用来测定酶促反应Km值的方法。它是将米氏方程
V=Vm[S]/（Km+[S]）变为倒数的形式：
1/V=（Km/Vm）X（1/[S]）+1/Vm。
实验时，选择不同的[S]测定对应的V，分别求出它们的倒数，以北/V对岸/[S]作图，绘制出直线。外推至与横轴7相交。
根据直线：Y=aX+b 的方程及变换的方程，即有：
横轴截距（-X）即为1/Km，有Km=-1/X
纵轴截距Y为1/Vm，即Vm=1/Y。
这样一来，就得到了酶促反应的动力学参数。
题 目： 3、在呼吸链（电子传递链）上，有几个磷酸化部位，他们分别位于什么地方？
考查点 ： 呼吸连与氧化磷酸化。
参考答案： NADH—→NADH脱氢酶—→辅酶Q—→细胞色素氧化酶b—→细胞色素C1—→细胞色素C—→细胞色素氧化酶—→氧气。
氧化磷酸化有3个偶联部位，它们分别为：NADH—→辅酶Q、还原辅酶Q—→细胞色素氧化酶b、细胞色素C—→氧气。。
抑制剂分别为：鱼藤酮、抗霉素A、氰化物。
题 目： 4、举出两项有关核酸研究的诺贝尔奖的成果及其获得者。
考查点 ： 生物化学研究进展。
参考答案： 1957年 化学奖Alexander R．Tod（英国），核苷酸和核苷酸辅酶的研究 。
1962年 生理学或医学奖 Francis H．C． Crick（英国），James D．Watson（美国）和 Maurice H．F． Wilkins（英国），发现核酸的分子结构（DNA双螺旋）及其对于活性物质中信息转移的重要性。
1968年 生理学或医学奖 Robert W．HOlley（美国），Har G．Khorana（美国）和Marshall．Nirenbeng（美国），阐明蛋白质生物合成中遗传密码及其功能。
1980年 化学奖 Paul Berg（美国），关于核酸化学，特别是重组 DNA的出色研究。Walter Glbert（美国）和 FrederiCk Sanger（英国），测定 DNA中的碱基序列。
1993年 生理学或医学奖 Richard J．ROberts（美国）和 PhilliP A．SharP（美国），发现断裂基因化学奖。 Kary n．wtullis（美国），发明 PCR方法。 。 Michael Smith（加拿大），建立 DNA合成用于定点诱变研究。
相关内容： 2000年、2001年诺贝尔奖的情况。
题 目： 5、真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？
考查点 ： 转录的酶学。
参考答案： 真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L 以下就会被抑制。RNA聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。
RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中，其功能是合成5.8S rRNA、18 S rRNA和28 S rRNA。
RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。
RNA聚合酶Ⅲ也存在于核质中，其功能是合成tRNA和5 S rRNA及转录Alu序列。
相关内容： 原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。
生 物 化 学
