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流式细胞仪使用规程
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2008-1-21

    设备名称流式细胞仪
    型  号FACSCalibur
    国别厂家美国Becton Dicknson公司

    主要指标
    1、激发激光波长488nm;
    2、三个荧光检测器FL1(535nm)、FL2(585nm)和FL3(630nm)。
    3、FLCV<2%
    4、分选:P>97%
     
    功能及应用范围
    1.可对有机微颗粒(细胞)和有机微颗粒内(细胞内)的物质、结构的物理和生物特性进行定量和定性分析。
    2.本技术广泛应用于基础和临床医学研究。
    流式细胞仪使用流程
    一.开机程序
    1.检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。
    2.打开储液箱,倒掉废液,并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS或FACSFLow),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。
    3.将FACSCalibur开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY,预热5—10分钟。排除过滤器内的气泡。
    4.如果需要打印,打开打印机电源。
    5.打开电脑,等待屏幕显示出标准的苹果标志。
    6.执行仪器PRIME功能一次,以排除Flowcell中的气泡。
    7.分析样品时,先用FACSFLow或PBS进行HIGHRUN约2分钟。
    做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个50ml离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。

    二.预设获取模式文件(AcquisitionTemplateFiles)
    1.从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
    2.选取屏幕左列绘图工具中的Dotplot,绘出一个或多个Dotplots(点图)。从DotPlot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源,并确定适当的x轴和y轴参数。
    3.选取屏幕左列绘图工具中的Histogram,同上法绘出一个Histogram(直方图)。
    4.将此视窗命名后储存于FACStationG3\BDApplications\CELLQuestFolder\EXP文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。

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