上述操作结束后准备接种
接种准备:准备好铁挡板、打火机、酒精喷壶、接种圈、装95%乙醇的搪瓷缸容器、尖头钳子、活动扳手,接种瓶。
接种操作
1、移开接种口附近的胶管,将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点着,(注意:如果有火焰顺着酒精溢出铁板外,则需要吹灭铁板两侧溢出的火焰。)
2、将接种圈沾酒精点着后套住接种口处,将扳手或钳子沾酒精后拧开螺帽后用钳子将其夹住拿出,吹灭螺帽和钳子上的火焰后迅速放入装95%乙醇的搪瓷缸容器里。
3、将接种瓶在火焰处拔开后迅速倒入发酵罐内。完毕后用钳子夹出螺帽拧上。整个过程确保无菌操作!
溶氧设定:发酵模式下溶氧的控制由有四种情况:按off键→按control键→ 按Auto键→setup→cascade→选择以下四种模式。
1、None状态:溶氧的控制主要通过增加空气流量和设定好固定的转速来控制。
2、Agit状态:溶氧的控制主要通过提高转速来控制,此状态在空气流量保持不变的情况下溶氧随着细胞消耗降低时通过增加转速来提高溶氧水平。直到转速达到设订的转速上限值为止。该过程为自动控制。
3、02 状态:该状态主要通过控制氧气与空气的混合百分比来控制。溶氧随着氧气百分比的增加而增加。为自动控制过程。
4、Agit/ 02 状态:该状态中溶氧的控制先是通过提高转速来增加的,当转速达到设定的上限值时若实际溶氧值仍没达到所需要的设定值,此时转速控制在上限值,开始以从小到大的百分比自动提高氧气的进入量,直到达到所设定的溶氧值附近为止。该过程亦为自动控制过程。
注意:在使用Agit状态和Agit/ 02 状态时,若实际溶氧值与设定值相差太大,则要确保所设定的搅拌转速上限值不要太大,否则转速会瞬间内增大带来太大的剪切力和大量的泡沫。实际操作中可以同时通过空气流量计的手动控制来辅助操作。
按off键→按control键→ 按Auto键→setup→此时界面中出现的P Gain和 l Gain为两个出厂设定好的参数,不要改动。
其他控制操作:
选择U1:1、开机后→按use键→按U1~U4单元的Fermentation 或cell culture键选择发酵模式或细胞培养模式;连续按翻阅键→分别对U1~U4单个单元进行控制操作。
2、Tem→按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键,输入设定值→按确定键→按 Disp Hi输入上限值后按确定键→ 按 DispLo输入下限值后按确定键;输入值若有错误按删除键后更改。
搅拌设定:按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定转速值→按确定键→Disp Hi和DispLo值的设定如上。
Pump A: 1、off→按control键→按manual→按 setpoint 设定百分比(以10秒为单位,如键入20%表示转2秒停8秒:100%表示连续运转)→Disp Hi和 DispLo的设定同上。PumpB和PumpC的设定与PumpA相同。
2、off→按control键→按Antiforma(消泡)键 →wet on和wet off 分别调节液位的高低。
3、PumpC暂时没有连接蠕动泵;蠕动泵3与碱相连,蠕动泵4与酸相连。
PH值设定:1.off→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键→Disp Hi和Disp Lo值的设定如上。
dO2值设定:按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键。
O2流量设定:按control键→ 按Auto键→按setpoint键输入设定的百分比。
Unit2、Unit3、Unit4的操作同上。

