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流式细胞仪--- FACSCanto之基本原理与应用
作者:刘益年 来源:美商必帝公司 时间:2007-3-10


    選擇“Instrument>Instrument Setup>Calculate
    Compensation”命令。

    FACSCanto 各部構造

    正確開機程序
    1. 開啟主電源。
    2. 開啟電腦。在密碼登錄框中,輸入BDIS,按Enter。
    3. 開啟BD FACSDiva 軟體。
    4. 確定軟體與細胞儀完成連線。
    5. 完成連線後,檢視各項試劑液面是否正常。
    6. 等待細胞儀自動完成液流啟動程式。
    7. 當液流啟動程式完成後,請點選OK。
    8. 檢視雷射是否暖機完成。
    整個程序約需5~10分鐘。

    上機檢查程序
    1. 檢品濃度調至1X106 cells/ml?一般只需0.5 ml。
    2. 是否已小心地去除檢品中之細胞團塊。
    3. 是否已將檢品放至FALCON 2052 試管中?試管
    是否有裂痕?
    4. 是否有足量專用鞘液? 是否已將廢液倒掉?
    5. 是否已執行Auto Clean ?
    6. 系統氣壓讀數55~65 Psi ?
    7. 是否已將液體過濾器中之氣泡排空?
    8. 請填寫使用登記表。

    建議使用之鞘液液體
    1. FACSFlow (BDIS)
    2. 經0.22um過濾之自備含0.05%NaN3之PBS
    不鼓勵使用下列溶液作為鞘液液體之用:
    - Fisher Hematology Diluent
    - Isoton III
    - Isolac D
    - DI water

    Low: 樣品流速= 10 l /min
    Medium:樣品流速= 60 l /min
    High: 樣品流速=120 l /min

    檢體吸取區(SIT)


    Remove Tube正確步驟
    步驟要確實:〔to minimize carry over between samples〕
    1. 在Acquisition Controls視窗中,點Remove tube;此時,會出現一個進程顯示對話框。
    2. 右手握著小管,左手將Aspirator arm向左搬到底。
    3. 取下樣品管。
    4. 放開左手,使Aspirator arm回到中央;此時,SIT會自動清洗;清洗完成後,進程顯示對話框會自動消失,在清洗動作完成前,請勿放下一管。

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