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流式细胞仪--- FACSCanto之基本原理与应用
作者:刘益年 来源:美商必帝公司 时间:2007-3-10

    大纲

    •实验设计原理

    •流式细胞仪运作原理

    实验设计原理
    1.藉由荧光抗体标识细胞之抗原特性

    淋巴球免疫分型

     FITC  PE  使用原理
     CD45  CD14  仪器可自动依据CD45 与CD14 之免疫荧光染色,测量三群白血球的比例,淋巴球(CD45 Bright /CD14-/Low FSC/ Low SSC) ,单核球(CD14+/CD45 Intermediate/High FSC/Intermediate SSC) ,颗粒性球(CD14 dim/CD45 dim/High FSC/High SSC) ,细胞碎片与红血球应是(CD14-/CD45-/Low FSC/Low SSC) 。
     IgG1  IgG1

     根据阴性对照组之染色程度来划分阳性/阴性之界线,依此界线在阴性
    对照的样品中,假阳性(Quardrant1+2+4)不得超过百分之二。

     CD3  CD19  T 细胞必须表达有CD3+ 抗原, B 细胞表达有CD19+ 抗原。此两群细
    胞与NK 细胞之总和应约略等于淋巴球的总数,可作为品管的指标。
     CD3  CD4  CD4+ T 细胞必须同时表达有CD3+ 与CD4+ 抗原。
     CD3  CD8  CD8+ T 细胞必须同时表达有CD3+ 与CD8+ 抗原。
     CD3  CD16+
    or CD56+
     

    NK 细胞必须不表达有CD3 抗原,同时表达有CD16+ 或CD56+ 抗
    原。NK 细胞与T & B 两群细胞之总和应约略等于淋巴球的总数,可
    作为品管的指标。

    治癌药物


    2.藉由荧光化合物标识细胞特性

    Annexin V Assay


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