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BD FACSCalibur流式细胞仪(FACS101 Handbook)
作者:未知 来源:生物秀 时间:2007-1-28

    收集实验数据
    30. 你可以开始收集实验数据了。HIGH RUN,将第一管样品放到检测区,在Acquisition Control窗口中,将 ý Setup 改成 ¨ Setup,此时CellQuest会自动显示 Your Folder:20031231.001为资料文件名。点击“Acquire” 便可启动样品之分析测定与数据储存。当计算机成功地收取足够数据,会自动储存数据文件20031231.001,并会以“嘟”声告知,CellQuest会自动升幂附加档名成20031231.002。等待下一指示。
    31. 你可以换上下一管样品,点击“Acquire” 启动样品之分析测定与数据储存。可继续分析直到所有检品都分析完毕。
    3.5实验数据之储存与备份:
    32. 不建议长期使用硬盘储存数据数据,可考虑以烧光盘(如配有 CD-RW)、口袋硬盘(Flash Drive)来备份大量实验数据,以免占用原有硬盘的内存,影响数据处理速度。可将备份后之数据,拿到另一苹果计算机或个人PC进行离机分析。
    33. 确认所有档案皆己备份后,以鼠标圈选欲删除数据,将其拖拉至Trash筒。
    退出软件
    34. 检品分析完毕后,记得从屏幕上方 File 指令栏选择 Save As,储存实验文件,以备日后使用,不需每次重新编辑。

    35. 从屏幕上方 Cytometer 指令栏,选择Instrument Setting,出现Instrument Setting窗口。点系print打印此次实验条件,可贴入实验笔记留底,再点击Save以储存此一实验的仪器条件,供日后再使用。点系SAVE后会出现文件保存对话方框,选择文件目录及文件名(例:Your Folder:/Your Setting1),点击Save。点击Done。

    36. 检品分析完毕后,用鼠标从屏幕上方 Acquire 指令栏中,选取Disconnect to Cytometer 以断绝计算机与仪器间之联机。之后如不分析数据,您可退出软件“File”à“Quit”(遇有选项永远选择“Don‘t save”),进行关机程序。 

    管路清洗
     37. 以2 ml 10% 漂白水取代样品,将样品架置于左位以外管吸除约1 ml,再将样品架置于中位 HI RUN 十分钟。改用 2 ml DI water。重复上述程序,样品架上留约 1 ml DI water 。按STANDBY五分钟。
      
    关主机、关计算机 

    四、数据分析
     
    FCS list mode数据文件:      
    说明:FCS list mode数据文件是流式细胞仪的标准格式档案(FCS2.0)。该文件含有从流式细胞仪收取的平均10,000个细胞数的资料,含有4~6个参数。一般软件无法打开list mode数据文件,需藉助如CellQuest, WinList, WinMDI, 等Flow 分析软件,才可开启、绘图、并进行分析统计。 

    4.1 开启一CellQuest实验文件
     1. 从屏幕上方File 菜单中选择New。桌面会出现一’Untitled’ 实验文件,可点击实验文件的右上角的放大钮,将实验文件窗口放大。

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