在安装柱前后测试压力差
如果柱压力太高,反装色谱柱,并用10-20倍柱体积的流动相冲洗色谱柱,监测压力变化
若出现沉淀 (如:蛋白凝聚、细胞物、聚合物) 设法用相应的可溶性溶剂,如 0.1% TFA / 80% 乙腈, 6M 盐酸胍, THF, HFIP
若仍无效,应考虑更换过滤片
色谱柱故障诊断与排除——更换柱头过滤片

色谱柱修复和再生——化学变化
由于键合相的水解或硅胶的溶解而造成的色谱柱填料的变化是不可逆的
由于污染而产生的色谱柱变化可以通过适当的清洗使之修复
梯度洗脱的方式 (水 -> 强有机溶剂) 通常最有效
低 pH 流动相, 如 0.1% TFA or 0.01M H3PO4, 也是有效的
升高温度(60-80℃)
Example:
4.6 mm ID x 15 cm Zorbax 300SB-C18
Flow rate: 1 mL / min; Temp: ~80℃
A: 0.1% TFA in water B: 0.1% TFA in acetonitrile
100% A for 30 min.; 0-100% B over 30 min.;
Hold 100% B for 30 min., Return to 100% A in 5 min.
Repeat 3 times.
l6M盐酸胍、异硫氰酸胍、尿素等溶液可用于清除蛋白质的沉积
lXDB, 有机聚合物等填料可使用高pH 水溶液 /有机溶液,如: 0.01M NaOH 50% 异丙醇 /水溶液,硅胶基质应尽量减少接触时间 (15-30 min).

