C.安全使用生物安全柜
1.使用生物安全柜:开始
戴手套防止手部被污染
在开始工作以前，将实验所必需的物品全部放进安全柜内，并对表面进行消毒处理
对生物安全柜工作台面，侧壁表面以及后壁内侧进行消毒处理
让生物安全柜工作区排气几分钟之后再开始工作
不要在工作区内排放过多的物品
在操作开始前关闭排水阀
2.使用生物安全柜:操作
不要阻塞前台或后墙附近的进气格栅
实验操作尽可能靠近安全柜内部进行
尽量减少手臂的移动。移动时要缓慢，防止干扰柜内气流
从安全柜内移出手臂之前，一定要进行表面消毒处理，然后缓慢移出（移动方向垂直于工作区开口）
降低外部气流震荡
拿放物品一定要遵守从洁净区到污染区的顺序
生物废弃物袋应放在安全柜内不能拿出安全柜
一旦实验过程中产生溢出物，用消毒纸巾置于其表面吸附清理
从安全柜内部拿取可能产生污染的物品时，一定要进行表面消毒处理
将产生气溶胶的器皿尽可能摆放在安全柜工作区靠里的位置
洁净的物品应放置在距离产生气溶胶器皿至少150mm外，降低交叉污染的可能性
将盛有样品的试管或试盘的表面密封以防止下沉气流侵袭样品
禁止使用气体火焰，以防影响安全柜内部气流
将会产生气流震荡的仪器，如混匀器，离心机或是定位器等放置在靠近柜内后壁1/3处
3.本生灯
加热器可能引起由内向外的气流威胁到实验操作人员的安全。并且降低二级生物安全柜的抗交叉污染性能。当二级生物安全柜完全关闭时，如果安全柜内的加热器持续工作，其产生的热量会损坏过滤器。
本生灯的安全:
当在操作中不使用电子加热器时，此类型的加热器可通过自动降低供气量来保持较小的火焰
紧急关闭阀门应该安置在安全柜附近，以应付紧急状况的发生
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加热器应该尽可能地放置在离工作前台较远的地方，防止其影响安全柜工作
电磁阀同供气管互锁以自动关闭加热器
4.使用生物安全柜:关闭
注意事项：尽量使处于安全柜持续工作状态，并对所有物品进行表面消毒处理，提供最大程度的人员保护。
系紧用过的生物废物袋
对安全柜内壁，后壁，工作台面，去水盘表面和前窗内侧进行消毒处理
使安全柜进行一段时间的气体空排
如果情况允许:安装前窗挡物板或关闭前操作窗口并开启紫外灯(如有需要）
5.用户维护
每三个月更换一次预过滤器
每年更换一次紫外灯
进行性能检验和认证（比如警报检查，基本气流测试等
IV.生物危害溢出和清理步骤
A.生物安全柜内:
等待至少5分钟，让安全柜充满气溶胶
在清理时穿戴实验服，安全眼镜和手套
清理时让安全柜继续工作
进行消毒处理并保证至少20分钟的接触时间
使用浸泡消毒剂的消毒纸巾吸附溢出物
使用浸泡消毒剂的消毒纸巾擦拭安全柜内壁，工作台表面和柜内所有设备
按照正确的生物废弃物处理步骤处理被污染的物质（比如高压灭菌器或BFI)
将可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高压灭菌盘并且用报纸包起来, 然后进行消毒或清理
用消毒剂对无法进行高压灭菌的物品进行至少20分钟的消毒处理后再拿出安全柜
脱下个人防护服并放进污染物收集袋中进行高压灭菌处理
在进行新的实验或者关闭安全柜之前，让安全柜运行10分钟
B.实验室内，安全柜外:
如果所要清理的物品达到2级生物安全水平或者更高，联系生物安全办公室负责人
先疏散实验室工作人员。至少15分钟以后，等气溶胶消散后再进入溢出区
将生物危害物袋内的污染服和其他任何物品进行高压灭菌处理
穿戴一次性实验大褂，安全眼镜和手套。
使用消毒剂进行清洁的具体步骤如下:
用干纸巾覆盖溢出物(用来吸附液体)，然后再放上浸泡消毒液的纸巾
使用消毒剂包围溢出五，确保消毒剂与污染溢出物充分接触，尽可能减少气溶胶的形成
对溢出物附近的所有物品进行消毒处理
等待20分钟，使消毒剂的消毒作用得到充分发挥
使用正确的消毒剂擦拭设备
按照正确的生物危害物处理程序处理被污染的物质(比如高压灭菌器或BFI)
对可回收利用的物品进行消毒处理
C. 离心机内部
疏散所有无关人员
30分钟后，待气溶胶完全沉淀后开始清理溢出物
进行清理时穿戴实验室服装，安全眼镜以及手套
将离心转子和离心桶移到离生物安全柜最近地方进行清洁
对离心机内部进行彻底的消毒
按照正确的生物危害物处理程序处理被污染的物质(比如高压灭菌器或 BFI)
D. 实验室外部，运输过程中
将标有生物危害警告标示的生物危害物装入一个不易破碎，密闭完好的容器中，然后在放入外层标有生物危害警告标示并且牢固的容器（制冷机，塑料盘或桶）内运送
如果在公共场所出现溢出物，不能在没有正确防护设备的情况下直接进行清洁处理
确保发生溢出物的区域安全，妥善安置无关人员远离溢出物
联系专业人员帮助进行清洁处理
在专业人员进行溢出物清理时随时待命，并在必要时给予协助
摘自: UCSD Biosafety handbook, UCSD EH&S Biosafety Team 1996.
THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA, USA. p95-97.
V. 参考资料:
User & Service Manual. Labculture® Class II Type A2 Biohazard Safety Cabinet: Esco Micro Pte Ltd.
Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL). 4th Edition. Office of Health and Safety (OHS), Centers for Disease Control and Prevention (CDC). US Department of Health.
Laboratory Biosafety Manual. Second Edition (revised). Interim guidelines. World Health Organization.
UCSD Biosafety handbook, UCSD EH&S Research Community for Biosafety. 1996.
UCSD Biosafety handbook, UCSD EH&S Biosafety Team 1996. THE UNIVERSITY OF CALIFORNIA.
