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普通光学显微镜原理与使用
作者:未知 来源:河北大学细胞生物学实验室 时间:2007-12-18

    2.3显微镜的成像原理
         显微镜和放大镜起着同样的作用,就是把近处的微小物体成一放大的像,以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。
         物体位于物镜前方,离开物镜的距离大于物镜的焦距,但小于两倍物镜焦距。所以,它经物镜以后,必然形成一个倒立的放大的实像A'B'。 A'B'靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像A''B''后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身,而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。

    3 显微镜的几个基本概念
    3.1 光源:能发射光波的物体。
    可见光频率范围:7.5×1014 - 3.9×1014  Hz。
    真空中对应的波长范围:390nm – 760nm
    相应光色:紫、蓝、青、绿、黄、橙、红
    3.2分辨率(鉴别距离):显微镜能分辨的最小距离,用D表示。显微镜的鉴别距离越小,分辨率越高。
               D=0.61λ/ nsin 
    D:分辨率  λ:光波的波长 N:介质折射率  α:物镜镜口角
    3.3孔径角:由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。
    3.4数值孔径:令N·A = nsin ,   叫物镜的数值孔径。
         数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系,越短,NA越大,分辨率越高。

    物镜数值孔径


    3.5放大率
        在显微镜下所看到的物像和实际物体之间的大小比例叫显微镜的放大率或放大倍数。显微镜下物像的放大主要由物镜、镜筒长度、目镜所决定。适合的放大倍数决定于物镜的数值孔径,一船应为数值孔径的500――1000倍。
    3.6像差

    像差

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