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库勒照明系统(Kohler illumination system)的正确调整
作者:沈彬源 来源:生物秀 时间:2007-12-16

     

    值得一提的是, 聚光镜的孔径光阑在显微镜出厂时已做好了对中并作了固定, 所以它是不必另作调中的, 不论在任何一个倍率的物镜下, 聚光镜的孔径光阑和所配用的物镜一定是同轴(或和轴)的.

    库勒照明系统调好之后:
    ◇显微镜的样品和视域就能获得均匀而又充份的照明, 也不会出现眩光,在成像的分辩率与反差之间也能达到最佳的兼顾;
    ◇光源的视场光阑控制着样品上受照明的区域, 而这一区域就是按照库勒照明系统的要求而调节的视场光阑大小, 它正好和所观察的视域大小相同, 从而减少了视域以外杂散光对所观察视域的影响, 尤其是可以免除显微照相底片上的灰雾;
    ◇从聚光镜出射的照明光束直径大小应调到与所用物镜的数值孔径相适配, 即聚光镜的孔径光阑应稍小于物镜的数值孔径, 以获得最佳的分辩率;

    ◇作显微照相时, 目镜内通常都会装上取景框分划板, 如图12所示, 底片上的取景范围就是这四个直角□□□□所限定的范围(注意!图12中的取景框是以一个与135胶卷幅面相近的矩形框来代替,用以说明显微照相时视场光阑所应收小的范围), 所以要把视场光阑收小到正好与取景框的四个角相接, 就可以把更多的杂散光限制在底片成像的范围以外; 如果不注意这样做, 杂散光太多就会使拍出来的显微照片蒙上一层灰雾,反差变坏!

    值得提醒的是, 以上所调整出来的库勒照明系统并不适用于低倍率的物镜, 例如5x以下. 要作好低倍率物镜下的显微观察, 首先要用10x物镜把显微镜的的照明光路系统调好, 然后把聚光镜上的旋进摆出式前端透镜摆出光路外, 这时才能和5x、4x、2.5x等物镜配用, 而聚光镜的高低位置则应保持不改变;
    ◇前端透镜摆出光路外时, 聚光镜的性能就会有根本的改变, 孔径光路不再有调控照明光束数值孔径的功能, 而光源发光体(灯丝)的像不再成像于孔径光阑上. 为避免成像模糊, 聚光镜的孔径光阑应开到最大, 样品成像的反差则由视场光阑所控制, 而照明光束的数值孔径现在也是由视场光阑来控制

    Acknowledgements: Photos from:
    1. Carl Zeiss, < Microscopy from very beginning > ;
    2. Molecular Expressions Microscopy:Anatomy of Microscope-Kohler Microscope Illumination.
    参考文献:
    1. 蔡司:《显微镜检法从头讲》.(生物秀仪器频道 www.bbioo.com)

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