焦旭雯 ,
(1.华南理工大学生物科学与工程学院,广州510640.
赵树进
2.广州军区广州总医院药学部,广州5100101
摘要:流式细胞术(FCM)是根据所测定的各种细胞性质的不同组合,从细胞群体中把某个亚群分选出来,并对它的功能和形态学进行研究或进一步培养分析。流式细胞术具有快速、灵敏和同时进行多参数检测等优点,对其基本原理和在高等植物中的应用进行了介绍。
关键词:流式细胞术;细胞参数测定;细胞核;原生质体;染色体分拣;综述
Applications of Flow Cytometry in Higher Plant Research
J IAO Xu—wen . ZHAO Shu—J in
(1.College ofBioscience&Biotechnology,South China University ofTechnology,Guangzhou 510640,China;
2.Department ofPharmacy,Guang~hou General Hospital ofGutm~hou Military Command,Guangzhou 510010,China) Abstract:Flow cytometry(FCM)is a current technique for sorting certain cell subset from various cellular associ—ations based on diferences in cell’s playsical and chemical properties, by which the selected cell subset could be further studied in function an d morphology.The advan tages of this techn ique include rapidity.sensitivity and syn—chronization of multi—parameter detection. The principles of FCM are briefly described. and its applications inplan t cytoplast,protoplast an d chromosome are reviewed.
Key words:Flow cytometry;Determination of cell param eters;Cell nuclei;Protoplast;Chromosome sorting;Review
流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20 世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应用于细胞生物学、免疫学、发育生物学、细胞动力学、生理学、分子生物学等生物学研究的各个领域,在其基础上建立的流式细胞仪系统,具有体积小、功能全和使用方便等特点。本文简要介绍FCM 的原理,对其在高等植物研究中的应用作了综述。
1流式细胞术的原理
流式细胞术是一种能够对液流中的细胞或其他微粒进行多参数快速分析和分选的技术。它的工作原理是:在一定压力下,细胞随鞘液从样品池通过喷嘴中心进入照明室,通过激光束时使激光发生散射和折射,由前向散射光(FSC,Forward scatter) 和侧向散射光(ssc,Side scatter)检测器把散射光信号转换成电信号,同时细胞所携带的荧光素被激发后所发出的荧光由聚光器收集。不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增管检测器,经放大后的荧光信号和散射光信号一起通过数据化处理,再输入电脑储存并据此对细胞进行分析和分选t21。流式细胞术的主要特点是:① 测量速度快,可在1 S内测定数万个细胞;② 同时进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理特性、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③ 是一门综合性的高科技方法,它综合了激光技术、计算机技术、流体力学、细胞化学、图像技术等领域的知识和成果;④ 既是细胞分析技术,又是精确的分选技术。总之,流式细胞术主要包括了样品的液流技术、细胞的分选和计数技术,以及数据的采集和分析技术等[3
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