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1890型PCR荧光分析仪介绍及应用
作者:未知 来源:互帼科学仪器 时间:2007-11-28

    Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。由于所设阈值都很低,所以Ct值分析实际上就是低浓度的荧光值分析。由于是低浓度,影响因素小,误差没被放大,所以具有良好的重现性

    由图可以看到当扩增越靠后定量的重复性就越差。主要是因为①荧光定量技术要求在低浓度坏境。因为荧光检测定量原理是在忽略分子间相互作用的情况下建立的。如果分子浓度高了,影响作用很复杂,而PCR扩增产物是高浓度的,因此重复性变差也很容易理解。②由于扩增末期,扩增效率可能因为大量的靶序列而产生不可控的影响。

    仪器的Ct值定量原理

    固定循环数后,荧光信号与模板数成正比,但当固定荧光信号值后,模板数就与循环数成反比。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

    1890型PCR荧光分析仪的特点
    -高速的加热降温循环系统
    -采用长寿命的LED激发光源
    -可对PCR扩增全过程进行实时动态监测
    -无需开启PCR反应管,可避免在PCR期间及PCR之后产物污染,确保结果准确
    -可用三种不同报告染料同时用于一个样品,在单一反应中取得更多信息
    -全中文界面,灵活的程序设定、全面的分析和报告功能,全部参数可储存
    -可打印多个或单个样本报告

    仪器主要技术规格
     样本数:                            32
     反应管(光学玻璃管)长:          35mm
     容积(反应体积)               10-20ul
     温度范围:                   40℃-98℃
     温度控制:                1℃/S-10℃/S
     激发光波长:               470nm(LED)
     发射光波长:           530,640,710nm
     检测灵敏度: 可在一个基因组中检测单拷贝
     软件操作系统:                  Win2000             
     输入电源/功率:       AC220V 50HZ/800VA

    仪器工作原理 (一)
     

     

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