1.目的
描述Waters高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围
化验室
3.责任者
化验员应严格遵照该操作规程,QC主管负责监督本规程的实施。
4.定义
HPLCHighPerformanceLiquidChromatography,高效液相色谱仪。
5.安全注意事项
5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程
6.1.WatersHPLC的组成：贮液器®输液泵®自动进样器®分离柱(柱温箱)®紫外检测器®控制及数据处理系统(Millennium32化学工作站)。
6.2.HPLC系统的打开及关闭顺序
6.2.1打开顺序
·对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开Millennium32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于510泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在Remote状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按Menu键，待显示屏切换至Mode状态下，其状态是Loca，按Edit/Enter键，在Local的L前有闪动的光标显示，按Ù键，Local转换成Rem，再按Edit/Enter键，此命令已输入进去,最后按Stop/Run键，使泵处于Run状态这时泵和工作站的连接即告成功。泵的任何动作都可由工作站来控制。还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于Alliance2690系统：先打开Alliance2690主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入Millennium32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经0.45mm的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表)过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
应养成良好操作习惯：
规范操作，树立保护HPLC整套系统的概念，尤其对于输液泵、色谱柱、检测器，在使用后应及时冲洗，以免污染而使其寿命缩短或损坏，尤其如操作者使用了含盐的流动相，更应注意清洗的步骤：首先用脱过气的纯水在流速为1ml/min左右冲洗30～60分钟，再用含50％以上甲醇或乙腈的水溶液以相同的流速冲洗20～30分钟左右。
如要卸下柱子，在经过上述冲洗过程之后，再经纯甲醇或乙腈以1ml/min的流速冲洗20~30分钟，柱子卸下后应马上拧紧柱堵。
流速的变化应采用阶梯式递增或递减的方式，启动泵时，应在2分钟之内由小流速慢慢增大到所需的流速，泵关闭时亦然(流速递减)。切忌流速的骤变。
6.2.2关闭顺序
首先退出Millennium32化学工作站，再关闭系统的其他部分。
