四、动态光散射仪的使用
1、样品制备
由于动态光散射仪对灰尘和气泡及其它大的颗粒非常敏感,所以制备样品时,一定要注意不要让样品中混有大颗粒物质。一般采取如下措施:

a)先将样品离心,12000g离心5分钟,离心时的温度视样品要求而定。取上层样品过滤,滤膜的选择要视样品分子大小而定,对蛋白质样品通常用0.02µm的滤膜,如果目标分子在100kD以上,建议用0.1µm的滤膜。过滤后的样品直接加样到样品室中。
2、加样步骤
将加样针伸到样品池的底部,一边加样一边缓缓向上提起加样针,以免形成气泡,然后盖上样品池的盖子。注意,加样针不能碰到样品池的窗口,否则会留下划痕,影响测量。
1)样品池的清洗与准备
2)动态光散射技术非常灵敏,所以对每一个细节的要求都很高。样品池的内外表面不能粘有脏物,不能有手指印迹等。
3)清洗步骤:用1%tritonX-100浸泡,超声清洗十分钟,然后用超纯水冲洗干净,再用高纯氮气吹干。检测是否洗干净的方法是装上超纯水,进行光散射测量,看散射光强是否与标准值接近。清洗干净的样品池保存在专用的盒子中备用。
3、数据分析与解释
*Polydispersity
CP<15%ofRH®均一(如下图上排所示)。注意:均一并不说明一定是单体,下图上排三种情况均是均一状态。
CP<30%ofRH®(如下图下排左一所示)
CP>30%ofRH®(如下图下排左二、三所示)


