(一)结构特点
1.氙灯、闪光灯
150W连续照明灯的光照强度足以进行灵敏度很高的荧光测量;闪光灯既可用于荧光测量,又可用于磷光测量。可根据自己的分析要求选择一种或两种光源。
2.单色器
均为Seya-Namioka设计,采用凹面全息光栅和为数极少的反射镜。既简单又耐用,不需要现场校准。计算机驱动光栅,控制狭缝,既准确(+/-0.1nm)、又快(12000nm/min),可靠性还高。
3.光电倍增管检测器
光电倍增管(PMT)有两种工作模式:a.模拟――高灵敏度,宽动态范围,操作方便;b.光子计数――提供极高的灵敏度,联结式盖锁可保护PMT。
4.附件
T-Optics多功能样品室可配多种附件,完成多种应用。
(二)功能特点
1.荧光发射光谱
选择某一固定波长的光激发样品,记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系,即得荧光发射光谱。
2.荧光激发光谱
选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱。
3.时间分辨技术;
可用于对混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。
时间分辨荧光测定公式如下:
P(t)=P0EXP(-t/τ)
式中P(t):拟合指数函数
P0:强度取值
EXP:指数运算符
t:时间取值
τ:荧光平均时间寿命
时间荧光光谱如图所示。其中A组分受激发而产生的荧光寿命短于B组分,因此可以对混合物中的A组分和B组分同时进行分辨和测量。

时间荧光光谱
4.偏振和各向异性技术;
荧光偏振和各向异性的测量揭示了荧光体吸收光子和随后发射光子的平均角移。偏振度与荧光体转动速度成反比,可用于测定抗体和抗原的含量。
5.同步扫描技术;
同步荧光技术是在同时扫描激发和发射波长的情况下来测绘荧光光谱图。由测得的荧光强度信号对发射或激发波长作图,即为同步荧光光谱。它包括固定波长的同步荧光和固定能量的同步荧光两种光谱。
(1)固定波长的同步荧光光谱
在同步扫描中,使激发波长和发射波长保持固定的波长间距,即在Δλ=λem-λex=常数的情况下进行扫描,以同步荧光信号(相对强度)对发射或激发波长测绘荧光光谱图,则为固定波长的同步荧光光谱。在同步扫描的荧光测定中,同步荧光信号强度Is是激发波长的函数,其基本公式为:
Is(λex,λem)=KcbEx(λex)EM(λem)
式中,c为待测物质的质量浓度,b为试样溶液的厚度,K为实验条件下某常数,Ex为激发光谱的强度分布,EM为发射光谱的强度分布。由(1)式可知,在实验条件保持固定的情况下,测试物质的同步荧光信号强度与待测物质的质量浓度成正比。这是定量分析的依据。在利用同步荧光测试样品前,$K值必须慎重选择,只有当Δλ恰好为某吸收带和其发射带之间的波长间距时,才能观察到同步信号。
(2)固定能量的同步荧光光谱
固定能量的同步荧光光谱是指在同步扫描过程中,使激发波长与发射波长之间保持着固定的能量差,即使得Δv=(1/λex–1/λem)×107为常数,Δv表示波数差(cm-1)。固定能量的同步荧光法与固定波长的同步荧光法相比较,后者能消除瑞利散射,但是不能消除喇曼散射,反而使喇曼散射加宽。固定能量的同步荧光法既能消除瑞利散射,又可消除喇曼散射,这有利于分析方法灵敏度和精密度的提高,故一般选用前一种方法。

