注意
Chrompack IonoSpher C 色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
1.简介
Chrompack IonoSpher C 柱填充硅胶基质的强阳离子交换材料,含有磺酸盐功能团。特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阳离子。
2.色谱柱老化
在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。再用你选用的洗脱液进行平衡。
在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。
3.洗脱液
推荐在这类柱上使用的洗脱液是要求低电导的缓冲液,例如柠檬酸或酒石酸缓冲液(或其混合溶液),pH范围从2.5到6.5,其中有乙二胺作为洗脱阳离子。
绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
洗脱液在使用以前要脱气,并用0.5微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。
一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。
4.流量和压力
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柱内径(毫米) |
流速 |
(ml/min) |
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最佳 |
最高 |
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2.0 |
0.2 |
1.0 |
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3.0 |
0.4 |
2.0 |
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4.6 |
1.0 |
4.0 |
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10.0 |
4.7 |
18.0 |
注意:最高压力:不锈钢柱:4500psi;玻璃柱:3000psi
增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
如果你想更换柱子,要降低流量至0,等待洗脱液完全流出柱子为止(2分钟)。
拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
使用保护柱(见第6节)会防止污染物沉积在分析柱上。
5.样品处理
保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱, 不管是来自流动相还是样品。特别地,要禁止导入颗粒杂质。这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。
6.保护柱
一定要使用保护柱,因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高而且影响选择性。对于ChromSep 柱我们建议使用ChromSep Cation 交换保护柱。当柱压增高的或者观察到柱效降低的时候就需要更换保护柱了。对于常用不锈钢柱,我们建议使用Chromguard Cation exchange High Efficiency(高效)柱(10X3.0mm) 或High Capacity(高容量)柱(50X3.0mm)。

