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阳离子交换柱使用手册(Chrompack HPLC IonoSpher C Columns)
作者:未知 来源:生物秀 时间:2007-7-14

    注意
    Chrompack IonoSpher C 色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。
    在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。
                            
    1.简介
    Chrompack IonoSpher C 柱填充硅胶基质的强阳离子交换材料,含有磺酸盐功能团。特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阳离子。
     
    2.色谱柱老化
    在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。
    要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。再用你选用的洗脱液进行平衡。
     
    在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。
    3.洗脱液
    推荐在这类柱上使用的洗脱液是要求低电导的缓冲液,例如柠檬酸或酒石酸缓冲液(或其混合溶液),pH范围从2.5到6.5,其中有乙二胺作为洗脱阳离子。
    绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。
    洗脱液在使用以前要脱气,并用0.5微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。
    一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。 
    4.流量和压力

    柱内径(毫米)

    流速

    ml/min

     

    最佳

    最高

    2.0

    0.2

    1.0

    3.0

    0.4

    2.0

    4.6

    1.0

    4.0

    10.0

    4.7

    18.0

    注意:最高压力:不锈钢柱:4500psi;玻璃柱:3000psi
     
    增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。
    如果你想更换柱子,要降低流量至0,等待洗脱液完全流出柱子为止(2分钟)。
    拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。
    高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。
    使用保护柱(见第6节)会防止污染物沉积在分析柱上。
     
    5.样品处理
    保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱, 不管是来自流动相还是样品。特别地,要禁止导入颗粒杂质。这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。
     
    6.保护柱
    一定要使用保护柱,因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高而且影响选择性。对于ChromSep 柱我们建议使用ChromSep Cation 交换保护柱。当柱压增高的或者观察到柱效降低的时候就需要更换保护柱了。对于常用不锈钢柱,我们建议使用Chromguard Cation exchange High Efficiency(高效)柱(10X3.0mm) 或High Capacity(高容量)柱(50X3.0mm)。

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