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waters 600e-2487 HPLC标准操作程序(SOP)
作者:xhz717 来源:DXY 时间:2007-7-12

    4.2.2. 如按完全装液法,用定量环定容进样时,进样量应不小于定量环体积的3倍(5~10倍准确性更佳)。
    4.3. 按〈Single〉标签内右边的进样(Inject)按钮,等待窗口底部状态档内显示“Waiting”后,方可进样。
    4.4. 将进样阀手柄转动至Load位置,将注射器针完全插入进样阀入口中,平稳地注入试样溶液,除另有规定外,让注射器留在进样阀上,将进样阀手柄快速转动至Inject位置,系统将自动运行,采集数据并记录图谱。
    4.5. 让进样阀手柄保持在Inject位置,到下次进样前1~2min切换回Load位置,将注射器从进样阀中拔出。
    4.6. 先用水再用试样溶液清洗注射器后,按以上程序继续进样,直至完成。

    5. 数据处理(外标法)和打印
    5.1. 右击系统主界面下的『Browse Project』图标,选择相应的项目,按「OK」进入Project窗口,选〈Channels〉标签。
    5.2. 建立处理方法 选择一个待积分的标准,右击后选“Review”进入Review窗口。按「Processing Method Wizard」图标(左边第一个)进入New Processing Method向导窗口,按「OK」。
    5.2.1. 划入一个感兴趣的最窄的峰,按「Next>」;
    5.2.2. 划入一段包含噪声的基线,按「Next>」;
    5.2.3. 划入一段要积分的区间,按「Next>」;
    5.2.4. 根据情况选择最小峰面积和最小峰高,按「Next>」、「Next>」;
    5.2.5. 在Name档内输入各组分峰的名称,按「Next>」、「Next>」;
    5.2.6. 在Method Name档内填写方法名称,按「Finish」。退出Review窗口。
    5.3. 修改标准 选中所有标准,右击后选“Alter Sample”进入Alter Sample窗口。
    5.3.1. 在Sample Type档内将Unknown改成Standard;
    5.3.2. 按「Amount」图标(左上第六个)进入Component Editor窗口;
    5.3.3. 按「Copy from Process Method」图标(左上第五个),选择刚建立的处理方法,按「Open」,在Value和Units档内分别输入标准所含各组分的数值和单位,完成后按「OK」回到Alter Sample窗口;
    5.3.4. 按「Save」图标存盘,退出Alter Sample窗口。
    5.4. 积分 先选中所有标准,再选中所有未知样品,右击后选“Process”进入Background Processing & Reporting窗口,选Use specified processing methods,在右边档内选择刚建立的处理方法,按「OK」。
    5.5. 打印 在Project窗口下选〈Results〉标签。
    5.5.1. 选中要打印的标准/样品,右击后选“Preview”进入Open Report Method窗口,选合适的打印方法,按「OK」进入Report Publisher (Preview)窗口,预览打印的结果。按打印(Print)图标(左上第二个)即可打印结果。
    5.5.2. 按「Close」可进入Report Publisher窗口对报告方法进行修改,完成后按「Print」图标(右数第二个)即可打印结果。
    5.6. 数据处理完成后,关闭所有窗口,在主界面下按「Logout」退出系统,关闭Millennium32软件,再依次关闭电脑主机、显示器、打印机。

    6. 清洗系统和关机
    6.1. 数据采集完毕后,关闭检测器,继续以工作流动相冲洗10min后,换水冲洗。
    6.2. 清洗进样阀
    6.2.1. 用启动注射器吸10ml超纯水;
    6.2.2. 将注射针导入口冲洗头(Rheodyne部件号7125-054)连接到注射器出口上(不要针),并将它们一起接到进样口上;
    6.2.3. 使进样阀保持在Inject位置,慢慢将水推入,水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈,由样品溢出管排出。
    6.3. 清洗柱
    6.3.1. C18柱先用超纯水以1ml/min冲洗40min以上,再用甲醇或乙腈冲洗20min。
    6.3.2. Protein PAK60柱先用超纯水冲洗90min以上,再用甲醇或乙腈冲洗40min。
    6.4. 用水冲洗柱后,分别用20ml超纯水冲洗柱塞杆外部和法兰盘上小孔。
    6.5. 清洗完成后,先将流速降到0,再依次关闭泵、脱气机、UPS,断开电源。
    6.6. 填写使用记录。

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