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waters 600e-2487 HPLC标准操作程序(SOP)
作者:xhz717 来源:DXY 时间:2007-7-12

    1. 准备
    1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相(应足够;流动相必须用0.45μm滤膜过滤)、样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。
    1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

    2. 开机和泵操作
    2.1. 开机
    2.1.1. 接通UPS的电源,依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器,待检测器自检结束显示测量状态时,打开打印机、电脑显示器、主机。
    2.1.2. 打开Millennium32软件,按「Login...」,输入用户名和密码,按「OK」注册进入系统主界面。在Project档内选择所需的项目,右击『Run Samples』图标,选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
    2.2. 更换溶剂
    2.2.1. 打开600E泵后,转动进口集合管阀手柄(以下简称手柄)至RUN位置;
    2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂,向右打开参照阀(断开柱和进样器);
    2.2.3. 按[Direct]键使其显示直接控制屏幕,设流速为1ml/min(梯度配比阀在0ml/min时不工作);
    2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道,设其比例为100%,其它为0%;
    2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出,放入一干净的空瓶中;
    2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置,用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂;
    2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内,继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止;
    2.2.8. 转动手柄至RUN位置,将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
    2.2.9. 重复5.2.2.4.~5.2.2.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。
    2.3. 排气泡
    2.3.1. 打开参照阀,换流动相为100%超纯水,设流速为10ml/min(注意:确认参照阀是打开的,否则可能损坏安装好的柱);
    2.3.2. 转动进口集合管阀手柄至DRAW位置,用启动注射器抽出约10ml水;
    2.3.3. 顺时钟转动手柄至INJ位置,缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出(注意不要将气泡注入泵中);
    2.3.4. 按[Stop flow]屏幕键停泵,关上参照阀。
    2.3.5. 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下泵出口管,用塑料管连接至塑料烧杯中,设流速为10ml/min,冲洗2~5min(或更长时间)后停泵,重新接上柱。


    3.1.2. 检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液,如漏液应予以排除。
    3.1.3. 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应在平均值的5~10%以内。如超出此范围,可初步判断为柱前管路仍有气泡,重复5.2.3.下的步骤。
    3.1.4. 压力波动平稳后,换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性前,让最少5~6倍柱体积的流动相通过系统。
    3.1.5. 在QuickSet窗口下的Instrument Method档内选择所需的仪器方法,按「Monitor」(此后泵由软件控制),观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移<10-3Au/min,噪声为10-4Au数量级,且压力平稳时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
    3.1.6. 按「Abort」图标(左上第五个),停止监视基线。
    3.2. 梯度模式
    3.2.1. 按检验方法规定的条件冲洗平衡系统,并注意压力波动变化和排气泡。
    3.2.2. 在进样前运行1~2次空白梯度。

    4. 进样
    4.1. 在QuickSet窗口内左下部选〈Single〉标签,在Sample Name档内填写试样名称;在Function档内选择试样类型(标准选“Inject Standards”;样品选“Inject Samples”);在Method Set档内选择所需的方法组;在Injection Volume档内输入进样体积;在Run Time档内输入记录时间。
    4.2. 用针头滤器过滤试样溶液(注射液可不必过滤),用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量。
    4.2.1. 如按部分装液法,用微量注射器定容进样时,进样量应不大于定量环体积的50%,并要求每次进样体积准确、相同;

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