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Helena SPIFE电泳仪尿蛋白电泳操作规程
作者:doctorli… 来源:DXY 时间:2007-7-10

    SPIFE电泳仪各种液体配制方法:

    1.染色液(STAIN):1升10%的冰醋酸复溶干粉染料。
    2.脱色液(DESTAIN):11升的蒸馏水加Citric Acid Destain晶体。
    3.清洗液(WASH):8升的蒸馏水加Tris-Bufferde Saline晶体。

    电泳仪操作流程:

    一、电泳部分:

    1.打开仪器电源;
    2.尿液样本的处理:临床送检样本需进行尿蛋白定性实验,对于定性实验两个加号以上的标本要进行适当的稀释;
    3.将准备好的样本用移液器取17ul加在点样盘的样本位中,注意不能有气泡;
    4.把点样刷按4、11、18的位置放入加样器中;
    5.将2ml左右的界面液加在电泳槽上;
    6.从试剂盒中取出琼脂糖片,移去琼脂糖上的一层薄膜,然后将琼脂糖片放入电泳槽中注意琼脂糖片下面不要有气泡;
    7.将滤纸(Blotter C)平铺在琼脂糖片上等滤纸完全浸湿后移去滤纸;
    8.将加样器放在点样盘上,同时启动程序,按START键两次再按CONTINUE键一次后按下加样器上的UP/DOWN开关,同时依程序中的倒计时时间听到仪器蜂鸣声后向上拨UP/DOWN开关,把加样器放入电泳槽中按CONTINUE键一次后按下UP/DOWN开关同时仪器开始倒计时,听到蜂鸣声后向上拨动UP/DOWN开关,点样结束;
    9.移开加样器,放好电极棒,关上电泳槽盖,按CONTINUE键一次进入电泳;
    10.听到仪器蜂鸣声后放入抗血清模板,在模板的各个条带中加入各自的抗血清50ul完毕后按CONTINUE键进入孵育;
    11.听到仪器蜂鸣声后将滤纸梳子(IFE Blotter Combs)放入模板的孔中按CONTINUE键吸收多余抗血清;
    12.听到仪器蜂鸣声后移开梳子和模板(Blotter D)平铺在琼脂糖片上,按CONTINUE键后用手在滤纸上施加均匀的力度并来回移动不少于3分钟;
    13.听到仪器蜂鸣声后移开滤纸CONTINUE键进行烘干;烘干温度定为60℃;
    14.听到仪器蜂鸣声后按CONTINUE键结束电泳程序。

    二、染色部分:

    1. 将琼脂糖片拿出挂在托架上放入染色槽中,小心不要将凝胶碰到染色槽壁,选择好程序后按两次START键两次CONTINUE,仪器自动完成染色、脱色、烘干的进程;
    2. 听到蜂鸣声后程序结束,按CONTINUE完成染色程序,拿出托架取下琼脂糖片进行扫描。


    2. 在PT的主画面中点击新建图标,选择Gel下拉菜单中凝胶类型,再点击扫描;
    3. 在曲线框中对曲线进行编辑,打印报告。

     

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