1.设备和供应：
1.1Waters breeze系列高效液相色谱
1.2色谱拄
1.3进样器
1.4涡旋搅拌器
1.5微量移液器及若干吸头
1.6烘箱（55℃）
1.7AccQ·TagA衍生管
2.材料和试剂：
2.1AccQ·TagA浓液
2.2CH₃CN
2.3AccQ·Fluor衍生剂
2.4AccQ·Fluor硼酸盐缓冲液
2.5高纯水
3.操作程序：
3.1色谱条件：
3.1.1色谱柱：AccQ·Tag column
3.1.2柱温：37℃

3.2试液配制：
3.2.1流动相：
A液：按1:10（v/v）将AccQ·TagA浓液与高纯水稀释,脱气即得。
B液：按60:40（v/v）将CH3CN与高纯水稀释,脱气即得。
3.2.2标准样品配制：用微量移液器移取100ul氨基酸标准品,加0.9ml高纯水稀释,混匀,备用。取稀释液10ul加入衍生管,加AccQ·Fluor硼酸盐缓冲液70ul,在涡旋搅拌下加入20ulAccQ·Fluor衍生剂,用封口膜封好,放入55℃烘箱中保温10分钟。取出,即可用于进样。
3.2.3供试品配制：按各供试品项下要求对样品进行稀释,照“标准样品配制”方法,自“取稀释液10ul加入衍生管”同法操作。
3.3系统适用性试验：
3.3.1色谱柱理论塔板数：取标准样品10ul注入进样孔，记录色谱图，两出主要成分的保留时间Tr和半峰高（W2/h）。按① 计算色谱柱的理论塔板数.如果测得的理论塔板数低于7000应改变色谱柱的某些条件,使理论塔板数达到要求。
3.3.2分离度：记录色谱图中相邻两峰的保留时间tr1和tr2,以及此相邻两峰的峰宽W1、W2。按②计算分离度，除另有规定外分离度应大于1.5。
3.4样品测定：分别取标准样品与供试品，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算样品中氨基酸含量。
3.5实验完毕后，用水清洗系统，然后用流动相冲洗色谱注,方可关机
4.其它诸如高分子量物质含量、其它物质含量和鉴别同法测定，并依据药品的不同国家药品标准做相应调整，诸如，分离柱类型，流动相类别等。
5.附录：
5.1做好洗脱液的脱气处理，防止泵起动后压力波动大流速不稳定。
5.2灰尘或流通池的堵塞是检测器出现故障的常见原因，在分析完高浓度的样品之后，要使用大量的流动相将其彻底冲出流通池。如果使用缓冲溶液作流动相,分析完后务必用水冲洗管路,因为缓冲溶液蒸发后会产生结晶,而引起管路堵塞。


主要参考文献：AccQ·Tag柱前衍生法包，中国药典2005版二部附录，
袁汉成《AccQ·Tag柱前衍生法专向培训》。