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岛津LC-10AT型HPLC操作规程
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2007-7-7

    目的:
    规范岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。
    范围:适用于岛津LC-10AT型高效液相色谱仪的使用。
    职责:质检员对本规程的实施负责。

    一、系统组成
    本系统由2个LC-10ATvp溶剂输送泵(分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站和电脑等组成,另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。

    二、准备
    1 、准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。
    2 、根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)和定量环。
    3、 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm滤膜过滤。(注意腐蚀性与有机系的的溶剂)
    4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
     接通电源,依次开启不间断电源、B泵、A 泵、检测器,待泵和检测器自检结束后,打开打印机、电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站。

    四、参数设定
    1、波长设定:在检测器显示初始屏幕时,按[func]键,用数字键输入所需波长值,按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。
    2 、流速设定:在A泵显示初始屏幕时,按[func]键,用数字键输入所需的流速(柱在线时流速一般不超过1ml/min),按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
    3 、流动相比例设定:在A泵显示初始屏幕时,按[conc]键,用数字键输入流动相B的浓度百分数,按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
    4、梯度设定:
    4.1  在A泵显示初始屏幕时,按[edit]键,[Enter]键;
    4.2  用数字键输入时间,按[Enter]键,重复按[func]键选择所需功能(FLOW设定流速,BCNC设定流动相B的浓度),按[Enter]键,用数字键输入设定值,按[Enter]键;
    4.3 重复上一步设定其它时间步骤;
    4.4  用数字键输入停止时间,重复按[func]键直至屏幕显示STOP,按[Enter]键。按[CE]键退出。

    五、更换流动相并排气泡
    1.将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
    2.逆时针转动A/B泵的排液阀180°,打开排液阀;
    3.按A/B泵的[purge]键,pump指示灯亮,泵大约以9.9ml/min的流速冲洗,3min(可设定)后自动停止;
    4.将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
    5.如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
    6.如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。

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