原因1：溶剂中的不溶物
— 应使用色谱纯溶剂，膜过滤（孔径不超过0.45μm）
原因2：样品中的不溶物
— 应对样品进行膜过滤（孔径不超过0.45μm）
原因3：泵，进样器等中的不溶物
— 在泵和进样器之间安装内置过滤器，在进样器和柱之间安装预过滤器
原因4：柱内不溶物的形成
4-1．由于溶剂的不互溶而产生的沉淀
—用能溶解沉淀物的溶剂冲洗色谱柱
4-2．在不互溶溶剂中由于进样而产生的沉淀
—检查样品液和流动相是否互溶
4-3．由于温度的改变或固定相的干涸而产生的沉淀
—将色谱柱密封紧，并保持室温恒定
操作压力上升故障排除
HPLC系统流程图：
吸入过滤器>>泵>>内置过滤器>>进样器>>预过滤器>>保护柱>>主分析柱>>检测器和排放系统
从流程图的末端依次断开部件，如从检测器开始断开，最容易引起阻塞的部件是：
预过滤器，保护柱和主分析柱
[注]：应记录新柱子在常规分析条件下的操作压力
柱堵塞的修复
步骤1：使用含盐缓冲液后（如离子对试剂）应用溶解性强的溶剂（如水）进行冲洗
步骤2：先断开检测器，然后用对来自样品中的物质有强溶解性的溶剂进行冲洗。 对于反相色谱柱，可使用甲醇，乙睛，四氢呋喃，氯仿，庚烷等，在此条件下，应避免溶剂的pH低于2或高于8
若经过步骤1和步骤2后，压力仍没下降至步骤3
步骤3：断开检测器，将色谱柱反方向放置，然后检查柱压
（1）若压力稳定下降，至步骤4
（2）若压力不下降，至步骤5
步骤4：保持色谱柱反方向连接，用低于0.5 ml/min 流速冲洗1小时
若步骤4不能降压，至步骤5
步骤5：若内置过滤器被堵塞，应冲洗或更换。柱连接端的拆卸或重装会导致柱效下降，（有效塔板数下降和不对称峰），若步骤5不能降低柱压，至步骤6
步骤6：若进口端的填料发生堵塞，柱子将不可能被彻底恢复，只能通过去掉进口端的部分填料，重新填充进行有限的柱效恢复。（2~5mm）
[注]：在多数情况下，柱效将严重地下降
步骤7：若步骤6无法改善柱子性能，那么柱子已无法修复，请注意当拆开连接端时柱子已不再得到质量保证。
柱效的下降：
导致柱有效塔板数和分离能力下降的主要原因是固定相的恶化和硅胶表面活性链的损失，在这些条件下柱子已不可能再恢复
