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葡萄酒的气相色谱分析
作者:未知 来源:生物秀 时间:2007-7-3

        二、定性分析 
        在好的色谱测定条件下,每个物质的保留时间是不变的,所以鉴定一个物质的保留时间就可以识别它。然而这种鉴定往往不是一目了然的,尤其是对某些未知峰,除了用已知文献资料对照查找外,往往还需采用不同的技术来确证。 
        1.离子交换 
        Dowex2或MerckⅢ型树脂可固定酒中的酸,然后被甲酸洗脱。这些柱同样可以检出会在流出液和水洗液中的中性物质。Amberlite IRA400的OHˉ除去糖。 
        2.皂化 
        用KOH溶液皂化一个酒可以除去脂,随后的萃取液中将不存在这些脂。使一个酒保持PH12.3,在40℃连续通氮气24小时,它的色谱图与对照样品比较,相当于脂的峰已经消失。 
        3.水解
        酸水解一个酒可以鉴定海藻糖。用3N盐溶液回流2小时,将酒水解,它的三甲基硅烷脂的色谱图表明,海藻糖全部消失,转化为葡萄糖。 
        4.还原 
        用氢硼化钠还原醛糖变为醛糖醇。当酒中存在木糖时,木糖醇的峰明显增加。若酒中存在相应于其它醛糖的多元醇时,不可能用这种方法。 
        5.生成各种衍生物
        利用特性反应生成衍生物可精确地鉴定物质,而且可以生成不同类型的衍生物使得同系物很好地分离。山梨糖醇、甘露糖醇和己六醇的三甲基硅烷衍生物是分离不好的,但乙酰基衍生物分离就较好。当然也可以选用不同的柱子来分离。 
        6.化学处理
        化学处理如萃取可以鉴定一些物质。比如在Saccharomyces cidri发酵液中加入一滴硫酸,用氮气处理2小时后,萃取物色谱图中的缩醛峰几乎全部消失了;同样,用乙醚萃取酒中的挥发酸,然后用2M的NaHCO3溶液清洗使之消失。用通氮气法可进行许多单一脂的浓缩以及最高分子量为C10的乙脂的浓缩。这些脂可以被浓缩500倍,而醇只能浓缩10到20倍。用己烷萃取也可得到高浓度的高分子量的脂。用乙醚萃取脂肪酸效果也很好。 
        7.注射纯物质 
        在同样的条件下注射纯物质,对比它们的保留时间,来鉴定色谱图中的未知物,是常用的方法。为了消除温度和其他客观因素的影响,最好是同时注射纯物质和样品,即在样品中加入一点纯物质,使得相一致的峰增高1到2厘米。这些纯物质必须是单一的峰,不能有任何分离。 
        8.注射同系物 
        在没有纯物质用于鉴定未知物时,有时可以注射相同系列的同系物。比如,所有的线性脂肪酸可以用于鉴定未知脂肪酸。我们知道这些物质的保留时间对数量与分子的碳原子数成线性关系,它可以测定在这个系列中,未知物是否可能出现。 
        9.光谱法鉴定
        对一些用以上叙述的方法难以鉴定的未知物,需进行收集物质用于红外分光光度鉴定,或色质谱联合使用可以鉴定完全未知的新物质。 
        三、定量分析 
        1.内标准的选择 
        定量醇我们不用丁醇—1做内标,因为在葡萄酒中总是存在着少量的丁醇—1,有时在蒸馏酒中它的量还是较大的。戊醇—1在定量高级醇时,它的保留时间太长,同样不能使用。直接注射酒样定量甲醇、乙酸乙脂和高级醇时,我们用4—甲基戊醇—2做内标。定量乳酸乙脂、乙酸乙脂、2,3—丁醇和丙醇,选用3—羟基乙酸乙脂做内标。定量丙三醇和2,3—丁二醇用5—甲基-3-己醇做内标。庚酸可作为定量有机酸的内标准。2—甲基丙基丁醇或己基己脂可被选用定量脂的内标。定量葡萄酒中的防腐剂可用十一酸做内标。对混合分层的浓缩物定量时用4—甲基戊醇—1做内标。?—苯基乙酸乙脂可作为单一定量?—苯基乙醇的内标,因为它们的浓度系数非常接近。定量多羟基化物时选用香草酸做内标,也可用戊二酸做内标。定量糖和多元醇选用季戊四醇做内标。 
        2.参考溶液的配制
        定量分析需要用纯物质配置与酒样相同的已知化学成分的参考溶液,用与酒样相同的方法处理这个溶液,随后做标准曲线来证明方法的可靠性。配制的溶液含有10%的乙醇,调pH到3左右。 
        3.重现性的测定 
        一种定量方法能够使用,首先需要知道它的重现性,即经过对同样方法处理的同样产品的10个样品分析结果看其再现性是否良好。也要测定其平均偏差。我们通常习惯测定这10个分析结果的平均偏差,基本上可以确定这种操作的定量精确性。在直接注射酒样的色谱定量中,其精密度是3%,但在酒通过离子交换树脂并在真空下浓缩的衍生物,平均偏差可能达到15%。 

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