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流式细胞仪[flow cytometry]及细胞凋亡检测技术
作者:未知 来源:中国科技大学生命科学实验中心 时间:2006-12-14

     

     

     

     

     

     



    A typical DNA Histogram  of  cell proliferation

    细胞凋亡检测技术

    1 几个概念

    1 荧光信号的面积:对荧光光通量进行积分

    2 DNA指数(DI):相对DNA含量

    3异倍体:非二倍体,包括近二倍体,四倍体,多倍体,非整倍体

    2 技术和方法
    凋亡细胞的特点:
    -在形态上,早期细胞核固缩,染色体边集在核膜内侧显新月体形、核碎裂;细胞浆和细胞器密度增高、细胞体积变小;细胞膜皱折卷曲,但早期细胞膜的完整性未受到破坏
    -凋亡细胞的FSC降低,SSC增加。
    -细胞坏死时,细胞肿胀,
    -FSC增大,SSC也增大

    Annexin V/PI双染
    活细胞为(Annexin V-/PI-)
      坏死细胞为(Annexin V+/PI+)
      凋亡细胞(Annexin V+/PI-)

    细胞周期
    不能区分凋亡与死亡细胞 Sub-G0/G peaks --- PI staining

    Annexin V Assay
    建议用于悬浮细胞

    Annexin V Assay
    能够区分死亡与凋亡

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