流式细胞仪的光学系统
流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。
光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。

1 流式细胞仪的散射光信号FSC:表示细胞大小
SSC:表示细胞内颗粒的复杂程度
外周全血细胞散射光双参数点图(红细胞溶解后)
2,荧光信号
-荧光素吸收激光能量
-荧光素将吸收能量释放,转换为:
振动能和热能
释放较入射光波长更长的光量子
-荧光素与特异抗体结合
-荧光抗体与细胞抗原结合越多,产生的荧光信号越强

