本文由生.物.秀根据“中国科技大学生命科学实验中心”的PPT课件整理，仅供大家学习参考。
流式细胞仪就是进行流式细胞分析的仪器，它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论于一体，是一种非常先进的检测仪器。
流式细胞仪的特点
1.单个细胞分析
2.同时多参数分析
3.速度快：10000个细胞/秒
4.统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况
5.分选感兴趣的细胞
•流式细胞仪的原理
-流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM,又名FACS）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选
-研究对象为生物颗粒，如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等
-研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量
流式细胞仪仪器结构
-液流系统
-光学系统
激光光源
光收集系统
-电子系统
光电转换
数据处理系统
细胞被戴上特殊的标记。所用的标记细 胞的探针是能够同待分选细胞表面特征性 蛋白(抗原)结合的抗体，而这种抗体又能 够同某种荧光染料结合。被结合的细胞带上了荧光标记。当稀释的细胞进入超声波 振荡器时，极稀的细胞悬浮液形成很小的液滴，一个液滴中只含有一个细胞。液滴一旦形成并通过激光束时，激光束激发结合在细胞表面抗体分子。
荧光染料及其发射波长
FITC 525nm
PE 575nm
PI 630nm
自发荧光与特异荧光
抗体的选择
首选直接标记抗体
荧光分子 PE最强，适用于弱表达抗原
FITC最便宜，适用于强表达抗原
间接标记：一般不提倡用
实验对照的设计
空白对照：ALL
阴性对照：常用同型抗体对照
单色分析：设同型抗体对照
多色分析：同型对照，单阳性对照（用于仪器校正）
阳性对照：检测阴性时
