Ⅱ级生物安全柜
在应用细胞和组织培养物来进行病毒繁殖或其他培养时，未经灭菌的房间空气通过工作台面是不符合要求的。Ⅱ级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护，而且能保护工作台面的物品不受房间空气的污染。Ⅱ级生物安全柜有四种不同的类型（分别为A1、A2、B1 和B2 型），它们不同于Ⅰ级生物安全柜之处为，只让经HEPA 过滤的（ 无菌的）空气流过工作台面。Ⅱ级生物安全柜可用于操作危险度2 级和3 级的感染性物质。在使用正压防护服的条件下，Ⅱ级生物安全柜也可用于操作危险度4 级的感染性物质。

Ⅱ 级A1 型生物安全柜
Ⅱ 级A1 型生物安全柜如图7 所示。内置风机将房间空气（供给空气） 经前面的开口引入安全柜内并进入前面的进风格栅。在正面开口处的空气流入速度至少应该达0.38 m/s。然后，供气先通过供风HEPA 过滤器，再向下流动通过工作台面。空气在向下流动到, , , 距工作台面大约6～18 cm 处分开， 其中的一半会通过前面的排风格栅，而另一半则通过后面的排风格栅排出。所有在工作台面形成的气溶胶立刻被这样向下的气流带走，并经两组排风格栅排出，从而为实验对象提供最好的保护。气流接着通过后面的压力通风系统到达位于安全柜顶部、介于供风和排风过滤器之间的空间。由于过滤器大小不同，大约70%的空气将经过供风HEPA 过滤器重新返回到生物安全柜内的操作区域，而剩余的30% 则经过排风过滤器进入房间内或被排到外面。
Ⅱ 级A1 型生物安全柜排出的空气可以重新排入房间里，也可以通过连接到专用通风管道上的套管或通过建筑物的排风系统排到建筑物外面。
安全柜所排出的经过加热和∕或冷却的空气重新排入房间内使用时，与直接排到外面环境相比具有降低能源消耗的优点。有些生物安全柜通过与排风系统的通风管道连接，还可以进行挥发性放射性核素以及挥发性有毒化学品的操作（表8）。

图7 Ⅱ 级A1 型生物安全柜原理图
A：前开口；B：窗口；C：排风HEPA 过滤器；D：后面的压力排风系统；E：供风HEPA 过滤器；F：风机  

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