确实地，两个研究小组发现BID-/-细胞经过复制胁迫或者etoposide（拓扑异构酶II的抑制剂）处理之后失去了在S期累积的本能，同时，再次表达BID可以拯救这个缺陷。Zinkel和他的同事表明，在拯救S期累积（S-phase accumulation）的过程中，并不需要BID的促凋亡BH3结构域，暗示了BID在S期的作用不同于它的促凋亡功能。两个研究小组都发现BID在应对DNA损伤时总是定位于核内，这表明BID可能基于亚细胞定位而有着不同的功能。
对处理过DNA损伤剂的细胞进行裂解液的Western杂交分析，Kamer等人发现：引起双链断裂的试剂可以诱导BID磷酸化。Zinkel不仅观察到了相似的效果，而且在使用引起复制胁迫的试剂时也得到了相似的结果。在体内，DNA修复激酶ATM（ataxia-telangiectasia mutated）被证实是BID磷酸化的主要激酶；然而在体外，BID是ATM和相关激酶ATR（ATM and RAD3-related）两个激酶的底物。需要指出的是，小鼠BID蛋白的保守位点S61和S78都被磷酸化了。
那么，在BID损害的细胞S期中究竟有什么事件发生，同时BID的磷酸化对DNA损伤反应都有着什么样的影响？为解决这个疑问，Zinkel和同事们在使用复制胁迫剂之后，做了有关复制停顿的评价分析。BID+/+的MPC细胞在S期就进入了复制停顿，而这一现象在BID-/-的细胞身上却未发现；而且这个结果在初级免疫激活的T细胞（primary activated T cell）中得到了验证。野生型和BH3突变的BID，可以拯救S期的停顿，但含不能磷酸化位点突变-S78A的BID则不行。这表明了BID在S78的磷酸化对于它在S期内的检查点中所起的作用是非常重要的。Kamer等人也说明了BID-/-细胞表达了不能磷酸化（nonphosphorylatable）的BID突变体，这种细胞比野生型细胞对损伤诱导凋亡更为敏感。由此看出，突变的BID丧失了诱导细胞周期停顿，很可能促使了BID损伤的细胞对DNA损坏的敏感性增加。
两项研究都表明了，BID在应对DNA损坏时，表现为细胞周期停顿（很可能接下来就是DNA修复）和细胞凋亡通路的平衡者，也可以说是细胞生存和细胞死亡的平衡者。现在看来，这种平衡是依赖于生物背景（包括细胞类型）和DNA的损坏水平和类型。
ORIGINAL RESEARCH PAPERS
Zinkel, S. S. et al. A role for proapoptotic BID in the DNA-damage response. Cell 122, 579−591 (2005) |Article | PubMed | ISI | ChemPort |
Kamer, I. et al. Proapoptotic BID is an ATM effector in the DNA-damage response. Cell 122, 593−603 (2005) |Article | PubMed | ISI | ChemPort |
