生命科学实验中心
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◇ 质粒DNA的提取
[实验原理] 碱裂解法提取质粒利用的是共价闭合环状质粒DNA与线状的染色体DNA片段在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于……
◇ 从动物肝脏中提取DNA
一、原理:在浓氯化钠(1—2mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小,在稀氯化钠(0.14 mol/L)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶……
◇ 植物总DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳检测
背景知识:核酸的存在形式:脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA) 与蛋白质结合在一起以核蛋白(DNP)的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋……
◇ 小麦线粒体DNA的高效提取方法
李文强, 张改生, 汪奎, 牛娜, 潘栋梁西北农林科技大学 陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室, 杨凌 7121 00摘要: 以小麦黄化苗为材料, 通过简单……
◇ 真核细胞基因组提取
真核细胞基因组提取 一. 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当宠大, 如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻基……
◇ 碱裂解法大量提取质粒DNA(同时纯化)
准备工作: 细菌培养:小量提取质粒DNA鉴定正确后,将菌液以1/50~1/20体积的比例接种到250ml液体培养基中,37℃振荡培养过夜至对数生长晚期。 注:培……
◇ 质粒DNA的小量制备
准备工作: 细菌培养:挑取单菌落,接种到3~5ml适宜的液体培养基(如氨苄青霉素抗性的标准LB培养基)中,37℃震荡培养过夜。 注:(1)最好在细菌的对数生长晚……
◇ 从质粒抽提谈起
复旦大学某教授写的有关质粒的好文,贴在这里与大家共享 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了,几乎……
◇ 质粒提取常见问题
1.溶液I—溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑……
◇ DNA抽提指南(TRIZOL)
按照RNA分离操作方案在完全移去水样层后,匀浆中的DNA存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后,DNA溶解在8 mM NaOH中。用TRIZ……
