生命科学实验中心
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◇ 真核细胞基因组提取
真核细胞基因组提取 一. 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当宠大, 如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻基……
◇ 碱裂解法大量提取质粒DNA(同时纯化)
准备工作: 细菌培养:小量提取质粒DNA鉴定正确后,将菌液以1/50~1/20体积的比例接种到250ml液体培养基中,37℃振荡培养过夜至对数生长晚期。 注:培……
◇ 质粒DNA的小量制备
准备工作: 细菌培养:挑取单菌落,接种到3~5ml适宜的液体培养基(如氨苄青霉素抗性的标准LB培养基)中,37℃震荡培养过夜。 注:(1)最好在细菌的对数生长晚……
◇ 从质粒抽提谈起
复旦大学某教授写的有关质粒的好文,贴在这里与大家共享 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了,几乎……
◇ 质粒提取常见问题
1.溶液I—溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑……
◇ DNA抽提指南(TRIZOL)
按照RNA分离操作方案在完全移去水样层后,匀浆中的DNA存在于中间层和苯酚层中也可以被分离出来。在沉淀和多次洗脱后,DNA溶解在8 mM NaOH中。用TRIZ……
◇ 质粒DNA形态的电子显微镜观察
一、原理球状蛋白质一般都可以在低盐溶液或蒸馏水表面形成不溶解的变性薄膜,若浓度合适,则肽链伸展形成蛋白质单分子层。一般用碱性蛋白质包围带负电的核酸分子,当蛋白质……
◇ CTAB Procedure
In the hood:96 well dish with bacteriatitertechmicrotubesglass pipetteRemove col……
◇ Concentration of DNA by ethanol precipitatio
(adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The Univer……
◇ Phenol extraction of DNA samples
(adapted from Bruce A. Roe, Department of Chemistry and Biochemistry, The Univer……
