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质粒[]plasmid 的制备
质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体,它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。 质粒的提取方法很多,大多包括3个主要……
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重组DNA技术[RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY]
一、重组DNA技术相关概念(一)DNA克隆 克隆(clone):来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。克隆化(cloning):获取同一拷贝……
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大肠杆菌glgC基因的克隆、序列分析与定点突变
董 云 洲 王 晓 峰 贾 士 荣 摘要:通过PCR,从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI 位点之间……
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转座子标签法克隆基因的改进
1 转座子及转座子标签法克隆基因 基因标签法克隆植物组织中的基因是较为常用的一种方法,T-DNA和转座子均可作为基因标签。 转座子最早由美国的细胞遗传……
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植物抗病基因克隆的研究进展
近年来抗性基因研究的突破性进展、抗性基因的克隆和序列分析所揭示的其编码蛋白的组成、拓扑学和亚细胞定位等特征,为揭开抗性基因的作用特点提供了线索。一般来讲,基因克……
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克隆心得:帮助新手快速做出克隆
本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创,我在其基础上进行了一些改动,主要是DNA回收上采取了更简单的方法。(本方法最适用于双酶切制作片断并进……
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DNA重组实验中常用的技术
一、质粒DNA的提取及鉴定 (一)质粒DNA的提取及鉴定1.收获细菌(1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于……
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优化基因表达的关键因素
在基因表达研究中,研究者比较注意选择合适的表达载体和宿主系统,而往往忽视基因本身是否与载体和宿主系统为最佳匹配这样一个实质性问题。基因的最佳化表达可以通过对基因……
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TA克隆常见问题分析及其解决方案
转化后无克隆菌产生 转化过程有问题或感受态细胞失活 可通过转化pUC18/19等未切割的可用于抗性筛选的质粒,检测感受态细胞的转化效率和转化……
◇
重组DNA的分离、克隆与测序实验手册
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