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实验室常用试剂的配制
作者:Randen L. Patter… 来源:PNAS 时间:2008-9-4

    1.无Ca2+ 、Mg2+Hanks液
                 NaCl                              4.5g
                  KCl                               0.2g
                 NaHCO                            0.175g   
                 Na2HPO4·12H2O           0.076g
                 KH2PO4                              0.03g
                 葡萄糖                             0.5g
                 0.4%酚红                           2.5ml
     将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO3 调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。
    2.甲基红试剂
       (1)成份
            甲基红    0.1g          蒸馏水    200ml
            95%乙醇  300ml
       (2)用途:测定甲基红反应。
    3.Hanks液(原液)
         原液甲: NaCl                              160g
                  KCl                               8g
                  MgSO4·7H2O                        2g
                  MgCl2·6H2O                        2g
      上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。
                  CaCl  2.8g溶于100ml双蒸水
     上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
         原液乙: Na2NPO4·12H2O                      3.04g
                  KH2PO4                              1.2g
                  葡萄糖                             20g
                  加入800ml双蒸水,溶解。
                  0.4%酚红溶液100ml
    上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
    使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks 液 使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO3调整PH值。
    4.0.4%酚红溶液
    称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒几乎完全解,加入0.lmol/LNaOHl0ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。  
    5.pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液)
                   Tris  (三羟甲基氨基甲烷)          1.03g
                    NH4Cl(氯化氨)                   3.735g
    加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。                                 
    6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液
     巴比妥                            1.84g 
    加蒸馏水 200ml 加热溶解
     
                   巴比妥纳                          10.3g
                    叠氮纳                            0.2g
                   加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
    7.磷酸盐缓冲液 (PB)
    A 液: 为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH2PO4 · H2O  27.6g, 溶于蒸馏水中, 最后补加蒸馏水至 1000ml 。
    B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na2HPO4.7H2O  3.6g(或 Na2HPO4·12H2O   71.6g, 或Na2HPO4 · 2H2O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。
    8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)
                     硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)          0.46g
                     硼酸(H2BO3)                   0.51g 
    加蒸馏水至100ml 溶解。
    9.PH7.4 0.01mol/L  磷酸盐缓冲液(PBS)
    配制方法一:
          0.2mol/L   Na2HPO4( Na2HPO4·12H2O  71.6g加蒸馏水至1000ml)
          0.2mol/L   NaH2PO4(NaH2PO4·2H2O  35.6g加蒸馏水至1000ml)
    取0.2mol/L Na2HPO4  81.0ml  加0.2mol/L  NaH2PO 19ml,再加1900mlH2O和17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L  PBS。
    PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。
    配制方法二:
    甲液(0.1mol/LKH2PO4溶液):KH2PO413.608g,加蒸馏水至1000ml。
    乙液(0.1mol/L Na2HPO4溶液):Na2HPO435.814g,加蒸馏水至1000ml。
    取甲液19ml,乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。

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