载体构建中的常见问题
-利用单酶切位点将片段插入载体
-双酶切中的问题
-对过长cDNA片段:可分段扩增，再利用RE位点或重叠延伸融合成全长cDNA
-酶切位点甲基化的问题
   Cla I    G6mATCGAT
   Xba I   TCTAG6mATC

真核表达载体的选择
-Promoter
    Conventional/Tissue-Specific/Inducible
-Poly (A) tail
-Kozak序列：－9GCCGCCA/GCCAUGG＋4

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