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SDS PAGE and Western Blotting
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2008-5-30

    Buffers and solutions:
    Transblot* buffer for wet transfer:
     12.1 g Tris
     57.7 g Glycine
     800 ml  MeOH
     QS to 4 liters with DI water.

    Transblot** buffer for continuous semidry transfer:
     39 mM Glycine  2.93g
     48 mM Tris  5.81g
     0.03% w/v SDS 0.375 g
     20% MeOH  200 ml
     QS to 1 liter with DI water.

    10 X TBS
     1.5 M NaCl   87.6 g
     100 mM Tris pH 7.5  12.1 g
     QS to 1000 mL with water.

    Laemmli Lower Tris Buffer (4X)
      1.5 M tris  90.83 g tris base
      0.4 % SDS  20.00 ml of 10 % SDS stock
      QS to 500 ml Water
      PH with HCl to 8.8

    Laemmli Upper Tris Buffer (4X)
      0.5 M tris  30.28 g tris base
      0.4 % SDS  20.00 ml of 10% SDS stock
      QS to 500 ml
      PH with HCl to 6.8

    Laemmli Reservoir Buffer (4X)    10X
      Tris base  12 g    30 g
      Glycine  57.6 g    144 g
      10 % SDS  40 ml    100 ml
      QS to 1000 ml
    PH with HCl to 8.3

    Laemmli Sample bufffer (4X)
      Glycerol  1.0ml
      10 % SDS  3.0 ml
      4X upper tris  1.25 ml
      bromophenol blue 0.210 ml of 1%
     ADD BME to 20 % just prior to use!!.
     
    Lower SDS PAGE GEL for Western Blot

    Lower SDS PAGE GEL for Western Blot

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