特点
成本较低，步骤较简单。
抗体回收率较高。
抗体纯度较高，电泳后可见少量杂带，适合于各种标记。
纯化后抗体体积大，需要浓缩。
需要冷柜，自动收集器。
4、亲和层析法
原理
利用蛋白质之间的特异性结合（抗体-抗原，受体-配体）将一种配基与凝胶颗粒结合,捕捉与它相配的物质。
洗脱一般采用改变pH值的方法
主要步骤
将Protein A与活化的柱子相结合(买商品柱)；
将腹水或血清处理后过柱；
用结合缓冲液洗柱子，直到A280值为零；
用甘氨酸缓冲液洗脱抗体，等量收集洗脱液；
测定洗脱液的A280值，保留A280值明显升高的样品；
汇集样品，浓缩，测定浓度。
葡萄球菌A蛋白 (staphylococcal protein A,SPA)
金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白
分子量42000,等电点pH5.1
可与大多数动物Ig的Fc段结合
一个SPA分子有4个相似的活性部位
与IgG的结合最强,与IgM,IgA的结合较差
特点
成本高，步骤较简单。
抗体回收率低。
抗体纯度高，适合于各种标记。
纯化后抗体体积大，需要浓缩。
需要自动收集器。
5、凝胶过滤法(分子筛)
原理
将样品混合物通过一定孔径的凝胶介质,由于流经路径的差异,使不同分子质量的组分分离.
大分子物质直接从凝胶颗粒外通过，走得快；小分子物质进入凝胶颗粒的内部再出来，走得慢。
适合于IgM类抗体的纯化(五聚体,分子量约800KD)
主要步骤
将腹水或血清处理后上柱,样品要浓；
(可用G-200，柱子要长，80-100cm)
待样品入柱后,用缓冲液过柱；
等量收集洗脱液,测定洗脱液的A280值。
收集第一峰。
特点
成本高，步骤较简单。
抗体回收率较高，分离条件缓和，抗体活性不受影响。
抗体纯度较高。
需要自动收集器。
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