六、IgE的分离与提纯
 
（一）材料与试剂
1．血清
2．饱和硫酸铵溶液
3．洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液
 0.025 Mol/L pH7.4PB液
0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)
4．DE52
5．SephadexG150
（二）操作方法
1．取血清倍比稀释后，加等量饱和（NH4）2SO4溶液，盐析。
2．离心取沉淀，溶于少量生理盐水中，透析、除盐。
3．过DE52柱，以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱，收集洗脱蛋白峰(IgG)，弃去。
4．换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱，洗下的蛋白峰主要是IgE。
5．透析除盐。
6．过G150柱，以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱，收集洗脱液即为纯化的IgE。
7．  浓缩、鉴定。 
 
七、连续提取免疫球蛋白法
 
（一）试剂及配制
1．饱和硫酸铵液
2．各种磷酸盐缓冲液
⑴ 0.2mol/L原液
A液：0.20Mol/L NaH₂PO₄液
 NaH₂PO₄·H₂O              31.20g
H₂O                       1 000ml
B液：0.20Mol/L Na₂HPO₄液
Na₂HPO₄·12H₂O             71.7g
H₂O                       1 000ml
⑵ 0.10Mol/L pH8.0PB液
             A液：                       53ml
      B液：                      947ml
      H₂O       加至            2 000ml
⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H₂O至2 000ml
⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水至2 000ml。
⑸ 0.035 Mol/L pH8.0 PB液
 取0.10.1 Mol/L pH8.0 PB液700ml，加水至2 000ml。
⑹ 0.10Mol/L pH5.8PB液
  A：                             920ml
  B：                              80ml
  H₂O       加至                 2 000ml
⑺ 0.40Mol/L pH5.2pB液
 a液.0.40Mol/L NaH₂PO₄液
   NaH₂PO₄·2H₂O                    62.40g
   H₂O       加至                   1 000ml
 B液.0.40Mol/L Na₂HPO₄液
 Na₂HPO₄·12H₂O                   143.4g
H₂O       加至                  1 000ml
         取a液                             960ml
           b液                               40ml 
           混合即可。 
 ⑻ 0.01 Mol/L pH8.0PBS液
  取0.10Mol/L pH8.0 PB液             100ml
  NaCl                                8.20g
  H₂O       加至                    1 000ml
3．DEAE-纤维素(细粒级)
4．SephadexG200

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