蛋白质的纯度鉴定
各种细分级的方法都可以用于纯度鉴定
常用各种电泳法,比较权威的有:等速电泳、梯度电泳、等电聚焦电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳。
沉降分析和扩散分析
测定沉降系数和扩散系数。
溶解度恒定法
加入样品量为横坐标,样品溶解量为纵坐标,作图。如只有一个拐点则说明样品纯
蛋白质分子量的测定
最小分子量测定法
如Mb含Fe为0.335%,则
M=55.8/0.335%=16700。这就是最小分子量。
其实,真实分子量是最小分子量的n倍,n指Fe的数目,Mb的n=1,所以M=16700;而Hb用其他方法测得分子量为68000,则说Hb含4个Fe原子。
渗透压法
超离心法
凝胶过滤法
经验公式:lgM=K1-K2Ve( K1、K2为常数)
用几种已知蛋白质,测其Ve,再对lgM作图得标准曲线。再测定未知蛋白质的Ve,可得M。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
lgM=K1—K2μR
(K1、K2为常数,μR为相对迁移率)
凯氏定氮法
Folin-酚试剂反应
紫外吸收法
考马斯亮蓝法
双缩脲反应

