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High Throughput Methods in Proteomics
作者:David Wishart… 来源:University of Alberta 时间:2008-5-24

    Molecular Biology Tools
    Northern/Southern Blotting
    Differential Display
    RNAi (small RNA interference)
    Serial Analysis of Gene Expression (SAGE)
    DNA Microarrays or Gene Chips
    Yeast two-hybrid analysis
    Immuno-precipitation/pull-down
    GFP Tagging & Microscopy

    Yeast Protein Localization

    Yeast Proteome Localized
    Used 6234 yeast strains expressing full-length, chromosomally tagged green fluorescent protein (GFP) fusion proteins
    Measured localization by fluorescence microscopy
    Localized 75% of the yeast proteome, into 22 distinct subcellular localization categories
    Provided localization information for 70% of previously unlocalized proteins

    22 Different Cellular Zones

    GFP Tagging the Yeast Proteome

    Fluorescence Microscopy

    Confirmation by Co-localization (GFP/RFP merging)

    Results

     

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