（二）单克隆抗体制备的技术要点
1、免疫动物选择纯系Balb/c小鼠
2、骨髓瘤细胞用以融合前应经过筛选
3、细胞融合
4、阳性克隆的筛选
5、克隆化
6、单克隆抗体的制备
7、单克隆抗体的纯化和鉴定
8、单克隆抗体的保存
（三）影响杂交瘤技术的因素
1、试剂与器材
用前必须经严格的筛选，尤其血清、融合剂
2、培养技术
防止污染，细胞培养的娴熟技能～
3、早期克隆化
避免无关细胞克隆的过度生长，但又应避免克隆细胞的丢失。
（四）单克隆抗体的应用
1、医学检验诊断试剂
利用单抗具有的特质-特异性与纯度高，理化性均一～
2、蛋白质的提纯
将其作为亲和层析中的重要配体～
3、肿瘤的导向治疗协助示踪
三、基因工程抗体技术
基因工程抗体（genetic engineering antibody）又称重组抗体，指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同需求进行改造和装配，经导入适宜的受体细胞后重新表达的抗体。
包括：（一）人源化、小分子、双价特异及抗体融合蛋白等。
（二）抗体库技术
（一）人源化抗体（humanized antibody）
人源化抗体指将鼠源性单抗，通过基因克隆和DNA重组及蛋白质工程学等技术，用人源氨基酸序列取代鼠的使其保留亲本鼠单抗的亲和性与特异性，但降低鼠单抗的异源性利于人体内使用。
1、嵌合抗体（chimeric antibody）
2、改形抗体（reshaped antibody）
（二）小分子抗体
小分子抗体指相对分子质量比较小但具有抗原结合功能的分子片段～。
小分子抗体：抗原结合片段（Fab）、可变
区片段（Fv）等～
优点：分子小，通透性强
原核细胞表达，成本低
不含Fc段，不与带Fc段受体反应
半衰期短，利于及时清除
（三）双特异性抗体
双特异性抗体(bispecific antibody)又称双功能抗体。他具有针对两个不同抗原位点结合的特性，可同时与两种不同抗原发生结合，不同于天然抗体。
1、化学交联～
2、细胞工程～
3、基因工程～
（四）抗体库技术
抗体库技术是指用细菌克隆代替B细胞克隆来表达制备各种抗体（抗体谱）。
噬菌体展示(phage display)，即用分子克隆的方法将外源基因片段插入噬菌体壳蛋白的非必需区，该基因的表达产物与壳蛋白一起以融合蛋白的形式展示于噬菌体颗粒的表面。
（四）抗体库技术
主要特点：
①简单快速（无须细胞融合）
②选择范围广
③可模拟体内免疫系统反应
④可直接获得特异性人抗体
⑤规模生产方便
