（三）免疫血清的纯化
1、特异性抗体的纯化
1）亲和层析
2）吸附
2、IgG类抗体的纯化
1）盐析
2）凝胶过滤
3）离子交换
4）亲和层析

在凝胶过滤柱（sephadex G-200）上血清蛋白的层析示意(M=IgM,  G=IgG,  A=IgA)

在DEAE-纤维素上人血清蛋白的层析示意图(M=IgM,  G=IgG,  A=IgA)

(四)免疫血清的鉴定
1、抗体效价的测定（凝集、扩散、ELISA）
2、特异性的鉴定（免疫印迹、双扩散）
3、纯度的鉴定（SDS-PEAG）
4、亲和力的鉴定—affnity指抗体与抗原结合的牢固程度，以亲和常数表示。测定方法有平衡透析、ELISA、竞争（非竞争）结合等。
 

单抗亲合常数的测定：
单抗亲合常数测定采用非竞争酶免疫试验法：
1）先确定在某一抗原浓度时抗体可以达到饱和；
2）以该抗原浓度为实验条件，饱和时的OD值作为OD-100，找出OD-50时的抗体浓度和相应的pp65抗原浓度；
3)根据公式计算McAb的Ka值。
t代表测定时的温度；
n=[Ab]t/[Ab’]t；
[Ab]t表示抗原浓度较高的Amax的一半；
[Ab’]t表示抗原浓度较低的Amax的一半。
对于单克隆抗体，一般亲合力要求>10⁷L/mol，好的单抗多大于10⁹ L/mol。

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