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抗体制备技术
作者:佚名 来源:生物秀 时间:2008-5-22

    3)鉴定:
         鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、
         纯度以及免疫学活性。
    蛋白的含量—定氮(紫外光280nm等)
    分子的质量—电泳、质谱
    蛋白的纯度—电泳、高效液相层析
    免疫学活性—免疫双扩散、免疫印迹

    抗原性质分析结果


    Westernblot鉴定三株单抗的特异性
    1.分子量标准;2.阴性对照:正常小鼠血清;3.纯化后的B6与病毒上清反应;4.纯化后的G12与病毒上清反应;5.纯化后的2B12与病毒上清反应。

    3、半抗原性免疫原的制备
            半抗原(hapten)~
            蛋白质等载体(carrier)~
            连接—物理法:即利用电荷和微孔吸附半抗原
                      化学法:利用某些功能基团把半抗原连接到载体分子上

    4、免疫佐剂(immunoadjuvant),佐剂
       指某些物质,因为该类物质与抗原物质一起或先于注入机体,可增强机体对该抗原物质的特异性免疫应答或改变免疫应答类型。
       种类—无机、生物性、人工合成、油剂和纳米颗粒。
       用途—抗原表面积增,构型改变;延长抗 原的滞留时间;增强吞噬~

    (二)免疫动物
    1、免疫动物的选择:
      ①抗原来源与动物种属的关系(越近越差)
     ②动物个体的选择(年龄、体重与健康,)
     ③抗原性质与动物种类
    2、免疫的方法:
       免疫原的剂量~
       免疫的途径与其间隔时间~
       免疫动物采血~
     (对实验成功与否至关重要)

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