2、可溶性抗原制备:
指蛋白质、多糖和脂类等。作为免疫原需要由细胞的破碎、提取与纯化~
1)细胞的破碎(物理法、化学法)
2)提取与纯化:
①超速离心分离—是一种根据分离物质的比重特点,通过差速或梯度密度离心,将分子大小不同的抗原颗粒分开的方法,只适宜少数大分子物质的分离。
②选择性沉淀—选择某抗原理化特性,采用相应沉淀剂或溶液环境~例50%饱和硫酸铵盐溶液可沉淀析出学清球蛋;8%~12%PEG 6000可沉淀IgG~。

盐析法沉淀抗原的机理
③超滤法—利用孔径大小不同的特制薄膜对不同分子大小的抗原物质进行滤筛~
④层析法—包括凝胶过滤、离子交换、亲和层析等,用于抗原等物质的精提~
⑤电泳——(略)
3)鉴定:
鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、
纯度以及免疫学活性。

凝胶过滤层析( 分子筛)的作用机理

亲和层析的作用机理


