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发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题
作者:杨晓林 来源:生物秀 时间:2008-5-20

    时间分辨荧光(也称时间延迟光致发光):Time Resolved Fluorescence
                   (Time Delayed Photoluminescence)解离增强荧光免疫分析(DEFIA)
    电化学发光(也称场致发光):Electrochemiluminescence(Electroluminescence)
    化学发光:Chemiluminescence

    这些发光检测技术的灵敏度及线性范围都已经接近了免疫反应的极限。
    片面宣扬检测技术灵敏度和线性范围的强弱,不仅毫无意义,而且也是荒谬的。
    灵敏度的瓶颈在于抗体亲合力和干扰免疫反应的因素,而不是检测技术。
    筛选抗体、屏蔽干扰,生产工艺、管理水平和技术服务是试剂生产的关键
    例如:电化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.005mIU/L
          第四代化学发光TSH检测试剂的分析灵敏度为0.001mIU/L
          原因在于抗体的亲合力,而不是检测技术。

    发光技术——临床免疫分析划时代的进步

    目前商品化发光免疫分析产品的几个特点
    大多采用全自动工作方式,部分采用微孔板半自动方式
    多数采用磁性或非磁性微粒包被,以增加表面积,使灵敏度进一步提高,反应时间大大缩短
    使用内建标准曲线加校正的办法产生工作曲线
    部分产品采用流动池测定方式(适合于闪光型发光或电化学发光)

    流动池检测方式示意图

     

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