免疫分析技术基本原理
利用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法
抗原：可诱导动物免疫系统产生免疫应答的物质。
抗体：由动物免疫系统产生，可特异性结合某种物质的球蛋白。
免疫测定技术分类
均相法（Homogeneous）
免疫凝集法：
自然凝集：血型测定
肥达氏反应；
敏化凝集：血球凝集法
凝胶（微粒）比浊法
免疫扩散法；免疫电泳法近场液闪法，
酶--辅酶（亚基）配位法
荧光偏振法，荧光共振法
吖啶酯水解法，生物传感器
非均相法（Heterogeneous）
免疫印迹（Western-blot）：基因表达分析、HIV感染确认实验
免疫组织化学技术：原位基因表达分析、临床病理学分析
纸片法：早孕快速检测、吸毒检测快速、献血快速检测
放射免疫法（RIA）：沉降法（放免）、固相法（免放，IRMA）
荧光免疫法（FIA）；酶联免疫法（EIA，ELISA）
酶联荧光法（FEIA）、化学发光法（LIA）
酶联化学发光法（ELIA）、时间分辨荧光法（DELFIA）、电化学发光法（ECLIA）；……
双抗体夹心法（三明志法）原理
夹心法的剂量--反应关系曲线
竞争法的原理
竞争法的剂量--反应关系曲线
间接法原理
俘获法原理
双抗原夹心法原理
间接包被夹心法原理
特点：所有试剂盒均采用同一包被物和包被工艺
发光免疫分析基本操作步骤（一步法）
发光免疫分析基本操作步骤（二步法） 
发光免疫分析技术的现状及应注意的问题
目前已商品化的光生物学标记检测技术整体性能比较
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技术类型 |
标记、反应体系 |
主要优点 |
主要不足 | |
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化
学
发
光 |
酶促 |
过氧化物酶、鲁米诺、氧化剂、增强剂等 |
测量方式简单（速率法）成本较低、灵敏度较高 |
工作曲线随时间漂移低端斜率呈非线性下移 |
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螺旋金刚烷环氧化物、碱性磷酸酶 |
测量方式简单（速率法）灵敏度较高 | |||
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非酶促 |
吖啶酯、过氧化氢 |
灵敏度较高 |
试剂成本高、发光时间短测量方式复杂（积分法）需原位进样(In Situ Injector)仪器成本及维护费用较高试剂成本较高 | |
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时间分辨荧光 |
铕（Eu）、镝(Dy)、钐（Sm）、铽（Tb）、等络合物脉冲光源激发 |
灵敏度较高、试剂较稳定 |
测量方式复杂（脉冲激发、间歇式测量、流动池）仪器成本及维护费用高环境及样品中同类元素可导致本底干扰 | |
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电化学发光 |
钌(Ru)的络合物脉冲电场激发 | |||
