各种细胞及各代细胞增殖的时间不尽相同。
原代细胞、成体组织的潜伏期较长,24h后仅见到部分细胞开始贴壁,9~12d长满瓶底,细胞融合呈交叉重叠生长。
传代细胞系、胚胎组织或幼体细胞潜伏期短,一般经过悬浮、贴壁伸展很快进入潜伏期、对数生长期,细胞大量繁殖,逐渐相连成片而长满瓶底。
一旦发现细胞长满瓶底80%就应及时传代,否则会影响细胞生长甚至脱落。
悬浮细胞当发现生长显著、密度增大、分布稠密、培养液变黄时也应及时传代。
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注意事项
标准化生产的培养板、培养瓶或皿一般成像效果都较好,但反复刷洗过的玻璃或塑料器皿将严重影响分辨力。
准备观察的瓶、皿要平坦,质地均匀,透光度好,在观察前将培养瓶、皿面擦净。
天气较冷时,由于温差使培养瓶内壁形成雾滴而影响观察的清晰度,可轻轻将瓶倾斜使瓶内培养液浸润内壁,以得到好的相差像。
对原代细胞培养进行相差显微照相,应在换液后进行,这样可以去除漂浮的组织块和死细胞,提高成像清晰度。
观察细胞时要有无菌概念,动作要轻,避免猛烈震荡;观察时间不要太长,观察次数也不要太频繁,以免影响细胞生长。


